生物安全与来源：生物安全等级为 1 级（BSL-1），无致病性，属于人类肠道正常菌群（非致病菌株），常规实验室规范操作（超净台接种、无菌耗材使用）下，对操作人员及环境无�：�。该菌株分离自健康人类肠道，经数十年验证，其生物学特性与临床非致病大肠杆菌完全一致，且药敏表型（对常见抗菌药物敏感）从未发生漂移，是连接临床检测与标准化实验的核心参照。
形态与培养特性：属于革兰氏阴性短杆菌，具有肠杆菌科典型形态与高适应性培养特征：
显微镜形态：菌体呈短杆状，直径 0.5-1.0μm，长度 1.0-2.0μm，常单个或成对排列，无芽孢，具有周生鞭毛（运动能力稳定，鞭毛染色后形态均一），革兰氏染色呈均匀红色（无着色不均，区别于其他革兰氏阴性杆菌）；
培养要求：对营养需求极低，在普通营养琼脂（NA）、胰酪大豆琼脂（TSA）、麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂（EMB）及 LB 琼脂中均能快速且均匀生长；兼性厌氧，最适生长温度 37℃（与人体体温完全适配），可耐受 10-45℃温度范围，生长速度稳定（37℃培养 16-18 小时菌落直径达 2-3mm），无延迟生长期，确保实验结果重复性；
菌落形态：在 TSA 平板上，形成圆形、表面光滑湿润、边缘整齐、乳白色不透明菌落（直径 2-3mm，大小均一）；在麦康凯琼脂上，因发酵乳糖产酸，菌落呈鲜艳粉红色（无颜色深浅差异）；在 EMB 琼脂上，菌落呈紫黑色且带有清晰金属光泽（标志性特征，无�：蛭薰庠笙窒螅辉谌樘欠⒔团嘌校岵芰ξ榷ǎǖ怪眯」苣谄萏寤� 1/3 以上），是微生物鉴定中 “标准阳性对照” 的理想形态。
生化与药敏特性：生化反应具有 “教科书级” 稳定性，是肠杆菌科鉴定的金标准参照：能发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇等糖类产酸产气（发酵速度与产气量均一，无批次差异）；触酶试验阳性、氧化酶试验阴性（反应结果快速且明确）；吲哚试验阳性、甲基红试验阳性、V-P 试验阴性、柠檬酸盐利用试验阴性（IMViC 试验结果严格为 “++--”，无任何变异）；不产生硫化氢，不分解尿素。核心优势在于药敏表型绝对稳定：经 CLSI（美国临床和实验室标准协会）标定，该菌株对青霉素类（氨苄西林）、头孢类（头孢曲松）、喹诺酮类（环丙沙星）、氨基糖苷类（庆大霉素）等 20 余种常见抗菌药物均呈敏感状态，且每种药物的最小抑菌浓度（MIC）均有明确标准范围（如环丙沙星 MIC 标准值 0.03-0.12μg/mL），是 AST 质控的 “基准标尺”。
未开封状态：产品主要以冻干粉（真空密封包装，含 10^7-10^8 CFU / 支活菌，含专用保护剂） 或标准化甘油菌悬液（20% 甘油，10^6 CFU/mL，-80℃专用） 形式供应：
冻干粉：未开封时需置于 - 20℃以下冷冻保存，长期储存（超过 1 年）建议放入 - 80℃冰箱，严禁反复冻融（反复冻融会使活菌率下降 60% 以上，破坏药敏稳定性）；保质期以 ATCC 官方标注为准，通常为 5 年（因保护剂技术先进，远超普通菌株保质期）；
甘油菌悬液：未开封时需直接置于 - 80℃冷冻保存，不可室温或冷藏放置，保质期 2 年；解冻时需 37℃水浴快速溶解（1 分钟内），解冻后需一次性使用，剩余菌液需灭菌后丢弃，不可再次冷冻。
复苏后状态：复苏后的菌液（TSB 肉汤培养）需 2-8℃冷藏保存，建议 5 天内使用完毕（因该菌株代谢稳定，冷藏期略长于普通大肠杆菌）；复苏后的斜面培养物（TSA 斜面）需 2-8℃冷藏保存，建议 2 周内传代一次，传代时需使用无抗菌药物的新鲜培养基，避免药物残留影响药敏表型；使用前需通过涂片镜检（确认菌体形态正常）及药敏预实验（验证 MIC 值在标准范围），确保菌株特性无漂移。
复苏操作：
冻干粉复苏：无菌环境下（超净台内），向冻干粉中加入 1mL 无菌胰酪大豆肉汤（TSB，需确认无抗菌药物污染），轻轻吹吸 5 次使粉末完全溶解，转移至无菌试管，37℃培养箱振荡培养（180rpm）14-16 小时；待菌液 OD600 值达 0.5-0.7（对数生长期中期，药敏表型最稳定）、镜检可见均一短杆菌时，即可用于实验；
甘油菌复苏：从 - 80℃取出后立即 37℃水浴解冻，用无菌枪头吸取 100μL 菌液接种至 5mL TSB 肉汤，37℃振荡培养 14-16 小时，待菌液浑浊后使用，无需再次稀释（浓度已标准化）。
传代培养：在超净台内，用无菌接种环蘸取少量复苏菌液，在 TSA 平板上分区划线（确保单菌落分离），37℃培养 16-18 小时；挑取形态典型（圆形、乳白色、光滑）的单菌落，可直接用于 AST 实验，或转接至 TSA 斜面（37℃培养 20 小时），2-8℃冷藏保存；传代次数严格控制在 3 代以内（普通菌株为 5 代），避免长期传代导致药敏特性微小漂移。
应用操作：
临床 AST 质控：作为 CLSI 推荐的 “首选质控菌株”，用于验证全自动药敏分析仪（如 VITEK 2、BD Phoenix）、药敏试纸条、微量肉汤稀释法的准确性，所有抗菌药物的 MIC 值需落在 ATCC 标定范围（如氨苄西林 MIC 2-8μg/mL），偏离则需校准设备或更换试剂，是临床合理用药的 “把关菌株”；
微生物鉴定验证：作为阳性对照，验证生化鉴定试剂盒（API 20E）、微生物质谱检测系统（MALDI-TOF MS）的鉴定准确性，确保临床样本中大肠杆菌与其他肠道致病菌（如肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌）的正确区分；
食品与环境检测：用于食品（乳制品、肉制品）、饮用水中大肠杆菌及大肠菌群检测方法的 “标准化验证”，确保不同实验室、不同批次检测结果的可比性；
科研与教学：作为分子生物学实验的 “标准宿主菌”，用于重组质粒扩增、蛋白质表达（如表达量标准化参照）；在微生物教学中，用于演示革兰氏染色、生化反应、药敏试验的标准操作，是培养实验技能的 “标杆菌种”。
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