生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具条件致病性，可引发免疫低下人群呼吸道感染及继发败血症，操作需在生物安全柜内进行，器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床肺炎患者痰液样本，生物学特性与临床呼吸道来源分离株高度一致，可模拟自然感染状态下的溶血表型与营养依赖行为。
形态与培养特性：革兰氏阴性球杆菌，具溶血特征与营养依赖双重鉴别点：
显微镜形态：菌体呈球杆状（0.3-0.5μm×0.8-1.2μm），常单个或成对排列（无聚集生长，区别于 ATCC19415），无芽孢、无鞭毛（非运动型），革兰氏染色呈均匀淡红色（易脱色，需控制染色时间在 30 秒内）；
培养要求：兼性厌氧，需含 5%-10% CO?环境，最适培养基为巧克力琼脂、含绵羊血的哥伦比亚血琼脂（需同时添加 X 因子与 V 因子，区别于仅需 X 因子的 ATCC19415），最适温度 35-37℃，生长速度中等（24-48 小时形成明显菌落），普通营养琼脂因缺乏 X/V 因子不生长；
菌落形态：血琼脂上呈圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的灰白色半透明菌落（直径 0.5-1mm），质地柔软，核心特征为β- 溶血（菌落周围形成清晰透明的溶血环，宽度 1-2mm，区别于无溶血的嗜血杆菌）；巧克力琼脂上菌落形态相似，但无溶血环（因巧克力琼脂中红细胞已破坏）。
生化与耐药特性：生化反应具物种特异性：氧化酶阳性、触酶阳性，发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气，不发酵乳糖、蔗糖；核心优势在于溶血与营养依赖双重稳定表型：对 X 因子（原卟啉 IX）和 V 因子（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）均高度依赖（双因子依赖，区别于单因子依赖的嗜血杆菌），β- 溶血特性与双因子依赖结合，是快速鉴别于流感嗜血杆菌（无溶血）、ATCC19415（单因子依赖、无溶血）的关键标志；药敏表型经 CLSI 标定，对氨苄西林、头孢呋辛敏感（氨苄西林 MIC 0.12-0.5μg/mL），对磺胺类药物（复方新诺明）中度敏感，是临床溶血型嗜血杆菌感染 AST 质控的可靠参照。
未开封状态：以冻干粉（真空包装，含 10^6-10^7 CFU / 支，含 X/V 双因子保护剂）或标准化甘油菌悬液（20% 甘油，10^5 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存，长期（>6 个月）建议 - 80℃储存，严禁反复冻融（活菌率下降 75% 以上，破坏溶血与双因子依赖特性），保质期 3 年；
甘油菌：直接 - 80℃保存，不可室温放置（室温暴露 20 分钟致活力下降 55%），保质期 2 年，解冻后一次性使用，剩余菌液灭菌后丢弃。
复苏后状态：复苏菌液（含 X/V 因子的巧克力肉汤培养）需 2-8℃冷藏，4 天内使用完毕；斜面培养物（含 X/V 因子的巧克力琼脂斜面）需 2-8℃冷藏，2 周内传代一次，传代时需含 5% CO?环境且培养基足量添加 X/V 因子，使用前需镜检确认菌体形态，并通过血琼脂培养验证 β- 溶血特性。
复苏操作：生物安全柜内，冻干粉加 1mL 无菌含 X/V 因子的巧克力肉汤溶解，转移至试管，37℃ 5% CO?培养箱培养 24-48 小时；待菌液浑浊、镜检见典型球杆菌，且接种血琼脂形成 β- 溶血菌落时，即可使用。
传代培养：生物安全柜内，挑取血琼脂上具 β- 溶血的单菌落，划线接种新鲜血琼脂平板，37℃ 5% CO?培养 24-48 小时；斜面保存后 2-8℃冷藏，传代≤3 代（避免丢失溶血特性与双因子依赖表型），每次传代后需通过血琼脂验证溶血环完整性。
应用操作：
临床质控：验证呼吸道样本鉴定系统（如质谱、生化试剂盒）对溶血型嗜血杆菌的检出准确性，避免与无溶血嗜血杆菌混淆；
AST 测试：校准氨苄西林、头孢呋辛等药物 MIC 值，指导临床溶血型嗜血杆菌感染用药；
物种鉴别：作为阳性对照，辅助开发嗜血杆菌属鉴别方法（如基于溶血与因子依赖的快速检测试纸）；
科研教学：用于嗜血杆菌属溶血机制研究，及微生物实验中 “溶血型细菌鉴别” 教学演示，对比不同嗜血杆菌的表型差异。
客服1