生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具致病性，可引发儿童脑膜炎、成人慢性阻塞性肺病急性加重，操作需在生物安全柜内进行，器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床肺炎患者痰液样本，生物学特性与临床非荚膜型流感嗜血杆菌（NTHi）高度一致，可模拟自然感染状态下的呼吸道定植与致病行为。
形态与培养特性：革兰氏阴性球杆菌，具双因子营养依赖特征：
显微镜形态：菌体呈球杆状（0.3-0.5μm×0.8-1.5μm），常单个或短链排列（无聚集生长），无芽孢、无鞭毛（非运动型），革兰氏染色呈均匀淡红色（易脱色，需控制染色时间 20-30 秒）；
培养要求：兼性厌氧，需含 5%-10% CO?环境，最适培养基为巧克力琼脂、含 X/V 因子的嗜血杆菌选择性琼脂（需同时添加 X 因子：原卟啉 IX、V 因子：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，缺一不可），最适温度 35-37℃，生长速度中等（24-48 小时形成明显菌落），普通营养琼脂因缺乏 X/V 因子不生长；
菌落形态：巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的灰白色半透明菌落（直径 0.5-1mm），质地柔软，挑取时易拉丝，无溶血现象（区别于 ATCC33390 溶血性嗜血杆菌），菌落常因黏液样物质呈 “水滴状” 外观。
生化与耐药特性：生化反应具物种特异性：氧化酶阳性、触酶阳性，发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气，不发酵乳糖、蔗糖；核心优势在于非荚膜型（NTHi）典型表型：无荚膜（区别于致病力更强的荚膜型 a-f 型），但仍具黏附呼吸道上皮细胞的能力，是社区获得性呼吸道感染的常见病原体；药敏表型经 CLSI 标定，对氨苄西林、阿莫西林 / 克拉维酸敏感（氨苄西林 MIC 0.25-1μg/mL），对大环内酯类（阿奇霉素）中度敏感，是临床 NTHi 感染 AST 质控的可靠参照。
未开封状态：以冻干粉（真空包装，含 10^6-10^7 CFU / 支，含 X/V 双因子保护剂）或标准化甘油菌悬液（20% 甘油，10^5 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存，长期（>6 个月）建议 - 80℃储存，严禁反复冻融（活菌率下降 70% 以上，破坏营养依赖特性），保质期 3 年；
甘油菌：直接 - 80℃保存，不可室温放置（室温暴露 20 分钟致活力下降 50%），保质期 2 年，解冻后一次性使用，剩余菌液灭菌后丢弃。
复苏后状态：复苏菌液（含 X/V 因子的巧克力肉汤培养）需 2-8℃冷藏，5 天内使用完毕；斜面培养物（含 X/V 因子的巧克力琼脂斜面）需 2-8℃冷藏，2 周内传代一次，传代时需含 5% CO?环境且培养基足量添加 X/V 因子，使用前需镜检确认菌体形态，并通过 X/V 因子依赖实验（接种无 X/V 因子培养基验证不生长）确认特性。
复苏操作：生物安全柜内，冻干粉加 1mL 无菌含 X/V 因子的巧克力肉汤溶解，转移至试管，37℃ 5% CO?培养箱培养 24-48 小时；待菌液浑浊、镜检见典型球杆菌，且接种巧克力琼脂形成 “水滴状” 菌落时，即可使用。
传代培养：生物安全柜内，挑取巧克力琼脂上的单菌落，划线接种新鲜巧克力琼脂平板，37℃ 5% CO?培养 24-48 小时；斜面保存后 2-8℃冷藏，传代≤3 代（避免丢失黏附表型），每次传代后需通过触酶试验验证菌株特性（确保阳性）。
应用操作：
临床质控：验证呼吸道样本鉴定系统（如质谱、生化试剂盒）对 NTHi 的检出准确性，避免与溶血性嗜血杆菌、肺炎链球菌混淆；
AST 测试：校准氨苄西林、阿莫西林 / 克拉维酸等药物 MIC 值，指导儿童与成人 NTHi 感染用药；
疫苗研究：作为 NTHi 对照菌株，辅助评估流感嗜血杆菌疫苗（如荚膜型 b 型疫苗）对非荚膜型菌株的交叉保护效果；
科研教学：用于 NTHi 黏附机制研究（如黏附素基因功能分析），及微生物实验中 “呼吸道致病菌鉴别” 教学演示，对比不同嗜血杆菌的溶血与营养依赖差异。
客服1