生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具强致病性，主要引发 5 岁以下儿童侵袭性感染，操作需在生物安全柜内进行，器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床儿童脑膜炎患者脑脊液样本，生物学特性与临床 Hib 分离株高度一致，可模拟自然感染状态下的侵袭性致病行为。
形态与培养特性：革兰氏阴性球杆菌，具荚膜与双因子营养依赖双重特征：
显微镜形态：菌体呈球杆状（0.3-0.6μm×0.8-1.6μm），单个或短链排列，无芽孢、无鞭毛，革兰氏染色呈均匀淡红色（易脱色，染色时间控制 20-30 秒），荚膜染色后可见清晰荚膜环绕菌体；
培养要求：兼性厌氧，需 5%-10% CO?环境，最适培养基为巧克力琼脂、含 X/V 因子的选择性琼脂（需同时添加 X 因子：原卟啉 IX、V 因子：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸），最适温度 35-37℃，生长速度中等（24-48 小时形成菌落），普通营养琼脂不生长；
菌落形态：巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑黏稠、边缘整齐的灰白色半透明菌落（直径 0.8-1.2mm），质地柔软，挑取时呈 “拉丝状”，无溶血现象，因荚膜存在，菌落具光泽且隆起明显（区别于无荚膜的 ATCC10211）。
生化与耐药特性：生化反应具物种特异性：氧化酶阳性、触酶阳性，发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气，不发酵乳糖、蔗糖；核心优势在于Hib 典型表型：含荚膜多糖（b 型特异性抗原），是引发儿童侵袭性感染的关键毒力因子；药敏表型经 CLSI 标定，对氨苄西林、头孢曲松敏感（氨苄西林 MIC 0.12-0.5μg/mL），对氯霉素中度敏感，是临床 Hib 感染 AST 质控的可靠参照。
未开封状态：以冻干粉（真空包装，含 10^6-10^7 CFU / 支，含 X/V 因子与荚膜保护剂）或甘油菌悬液（20% 甘油，10^5 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存，长期（>6 个月）建议 - 80℃储存，严禁反复冻融（活菌率下降 75% 以上，破坏荚膜与营养依赖特性），保质期 3 年；
甘油菌：直接 - 80℃保存，室温暴露 20 分钟致活力下降 55%，保质期 2 年，解冻后一次性使用。
复苏后状态：复苏菌液（含 X/V 因子巧克力肉汤培养）2-8℃冷藏 5 天内使用；斜面培养物（含 X/V 因子巧克力琼脂斜面）2-8℃冷藏 2 周内传代，传代需 5% CO?环境，使用前需镜检确认荚膜形态，并通过 X/V 因子依赖实验验证特性。
复苏操作：生物安全柜内，冻干粉加 1mL 含 X/V 因子巧克力肉汤溶解，37℃ 5% CO?培养 24-48 小时；待菌液浑浊、镜检见带荚膜菌体，且巧克力琼脂形成黏稠菌落时使用。
传代培养：挑取巧克力琼脂单菌落，划线接种新鲜平板，37℃ 5% CO?培养 24-48 小时；斜面保存后 2-8℃冷藏，传代≤3 代（避免荚膜丢失），每次传代后需荚膜染色验证荚膜完整性。
应用操作：
临床质控：验证儿童脑脊液、血液样本鉴定系统对 Hib 的检出准确性，避免与其他嗜血杆菌混淆；
AST 测试：校准氨苄西林、头孢曲松等药物 MIC 值，指导儿童 Hib 感染用药；
疫苗研究：作为 Hib 疫苗抗原对照，评估疫苗免疫原性与保护效果；
科研教学：用于 Hib 荚膜致病机制研究，及微生物实验中 “荚膜菌鉴别” 教学演示。
客服1