ATCC 9006 流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源:生物安全等级为 2 级(BSL-2),具基础研究适配性,无特殊耐药性,致病性较弱(主要用于实验研究,非临床强致病株),操作需在生物安全柜内进行,器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自健康人群鼻咽部样本,生物学特性代表流感嗜血杆菌属典型表型,可作为该属菌株鉴定的 “标准模板”。
形态与培养特性:革兰氏阴性球杆菌,具双因子营养依赖典型特征:
显微镜形态:菌体呈典型球杆状(0.3-0.5μm×0.8-1.5μm),单个或成对排列,无芽孢、无鞭毛,革兰氏染色呈均匀淡红色(染色时间易控制,20-30 秒即可,适配教学实验),无荚膜;
培养要求:兼性厌氧,需 5%-10% CO?环境,最适培养基为巧克力琼脂、含 X/V 因子的基础营养琼脂(无需特殊添加剂,适配常规实验室条件),最适温度 35-37℃,生长速度稳定(24-48 小时形成清晰菌落),普通营养琼脂因缺乏 X/V 因子不生长(可作为营养依赖特性教学案例);
菌落形态:巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的灰白色半透明菌落(直径 0.5-1.0mm),质地柔软,挑取时易拉丝,无溶血现象,菌落分布均匀(适配计数与分离教学实验)。
生化与药敏特性:生化反应具属级典型性:氧化酶阳性、触酶阳性,发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气,不发酵乳糖、蔗糖(生化反应结果稳定,无变异,适配生化鉴定教学);核心优势在于标准药敏表型:对临床常用抗菌药物(氨苄西林、阿莫西林、头孢呋辛、阿奇霉素)均敏感,MIC 值高度标准化(氨苄西林 MIC 0.12-0.25μg/mL),无耐药基因携带,是 AST 方法建立与试剂校准的 “金标准参照”。
三、储存环境
未开封状态:以冻干粉(真空包装,含 10^7-10^8 CFU / 支,含 X/V 因子与基础菌株保护剂)或甘油菌悬液(20% 甘油,10^6 CFU/mL,-80℃专用)供应:
冻干粉:-20℃以下冷冻保存,长期(>1 年)建议 - 80℃储存,严禁反复冻融(活菌率下降 60% 以上,破坏标准表型),保质期 5 年(因表型稳定,保质期长于临床耐药株);
甘油菌:直接 - 80℃保存,室温暴露 30 分钟致活力下降 40%,保质期 3 年,解冻后可分装少量用于短期实验(适配多次基础实验需求)。
复苏后状态:复苏菌液(含 X/V 因子巧克力肉汤培养)2-8℃冷藏 7 天内使用(因无耐药基因,代谢稳定,保存时间长于耐药株);斜面培养物(含 X/V 因子巧克力琼脂斜面)2-8℃冷藏 3 周内传代,传代需 5% CO?环境,使用前需镜检确认典型球杆状形态,并通过氨苄西林药敏预实验验证敏感性(确保标准表型未漂移)。
四、使用方法
复苏操作:生物安全柜内,冻干粉加 1mL 含 X/V 因子巧克力肉汤溶解,37℃ 5% CO?培养箱培养 24-48 小时;待菌液浑浊、镜检见典型球杆菌,且巧克力琼脂形成均匀菌落时使用(复苏成功率高,适配新手操作)。
传代培养:挑取巧克力琼脂单菌落,划线接种新鲜巧克力琼脂平板,37℃ 5% CO?培养 24-48 小时;斜面保存后 2-8℃冷藏,传代≤5 代(因表型稳定,传代次数多于耐药株),每次传代后需生化反应(氧化酶、触酶)验证典型特性。
应用操作:
基础教学:用于微生物实验教学(革兰氏染色、菌落形态观察、生化鉴定、AST 操作),作为学生实操的 “标准菌株”;
方法建立:用于流感嗜血杆菌鉴定方法(如质谱数据库构建、PCR 引物验证)的基础建立,确保方法特异性与准确性;
AST 校准:校准 AST 试剂(药敏纸片、药敏板)的 MIC 值,验证 AST 仪器(如自动药敏分析仪)的检测性能;
基础研究:用于流感嗜血杆菌生理代谢、营养需求、黏附机制等基础研究,作为实验对照组菌株。


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