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ATCC10014副溶血性嗜血杆菌Haemophilus parahaemolyticus

ATCC 10014 副溶血性嗜血杆菌(Haemophilus parahaemolyticus)产品简介一、产品名称官方名称为 ATCC 10014 副溶血性嗜血杆菌,拉丁学名为Haemophilus parahaemolyticus,由美国典型培养物保藏中心(ATCC)保藏。作为嗜血杆菌属中具溶血特性的代表性标准菌株,其遗传背景清晰、溶血表型与营养需求稳定,核心用于临床呼吸道(

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ATCC 10014 副溶血性嗜血杆菌(Haemophilus parahaemolyticus)产品简介

一、产品名称

官方名称为 ATCC 10014 副溶血性嗜血杆菌,拉丁学名为Haemophilus parahaemolyticus,由美国典型培养物保藏中心(ATCC)保藏。作为嗜血杆菌属中具溶血特性的代表性标准菌株,其遗传背景清晰、溶血表型与营养需求稳定,核心用于临床呼吸道(咽炎、支气管炎)感染微生物鉴别诊断、嗜血杆菌属物种区分检测,同时在溶血机制研究及微生物鉴定试剂验证中具有关键价值,是连接嗜血杆菌属物种鉴别与临床检测准确性的重要对照菌株。

二、产品特点

  1. 生物安全与来源:生物安全等级为 2 级(BSL-2),具条件致病性,偶引发免疫低下人群呼吸道感染,操作需在生物安全柜内进行,器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床咽炎患者咽拭子样本,生物学特性与临床分离株高度一致,可模拟自然感染状态下的溶血表型与定植行为,且因溶血特性易与其他嗜血杆菌区分,是物种鉴别理想参照。

  1. 形态与培养特性:革兰氏阴性球杆菌,具溶血与营养依赖双重鉴别特征:

    • 显微镜形态:菌体呈球杆状(0.3-0.5μm×0.8-1.5μm),单个或成对排列,无芽孢、无鞭毛,革兰氏染色呈均匀淡红色(易脱色,染色时间控制 20-30 秒,适配常规染色操作),无荚膜;

    • 培养要求:兼性厌氧,需 5%-10% CO?环境,最适培养基为含绵羊血的哥伦比亚琼脂、巧克力琼脂(需添加 X 因子,无需 V 因子,区别于流感嗜血杆菌双因子依赖),最适温度 35-37℃,生长速度中等(24-48 小时形成明显菌落),普通营养琼脂因缺乏 X 因子不生长(可作为单因子依赖特性教学案例);

    • 菌落形态:血琼脂上呈圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的灰白色半透明菌落(直径 0.5-1.0mm),质地柔软,挑取时易拉丝,核心特征为 β- 溶血(菌落周围形成清晰透明的溶血环,宽度 1-2mm,区别于无溶血的流感嗜血杆菌);巧克力琼脂上菌落形态相似,但无溶血环(因红细胞已破坏,仅血琼脂可体现溶血特性)。

  1. 生化与药敏特性:生化反应具物种特异性:氧化酶阳性、触酶阳性,发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气,不发酵乳糖、蔗糖(生化结果稳定,与流感嗜血杆菌部分重叠,需结合溶血与营养因子依赖区分);核心优势在于标准药敏表型:对临床常用抗菌药物(氨苄西林、阿莫西林 / 克拉维酸、头孢呋辛)均敏感,MIC 值高度标准化(氨苄西林 MIC 0.12-0.25μg/mL),无耐药基因携带,既适配 AST 方法校准,又可通过药敏结果辅助确认物种,避免与耐药菌株混淆。

三、储存环境

  1. 未开封状态:以冻干粉(真空包装,含 10^6-10^7 CFU / 支,含 X 因子与溶血表型保护剂)或甘油菌悬液(20% 甘油,10^5 CFU/mL,-80℃专用)供应:

    • 冻干粉:-20℃以下冷冻保存,长期(>1 年)建议 - 80℃储存,严禁反复冻融(活菌率下降 60% 以上,破坏溶血与营养依赖特性),保质期 3 年;

    • 甘油菌:直接 - 80℃保存,室温暴露 30 分钟致活力下降 40%,保质期 2 年,解冻后可分装少量用于短期实验(适配多次鉴别实验需求)。

  1. 复苏后状态:复苏菌液(含 X 因子的巧克力肉汤培养)2-8℃冷藏 7 天内使用(代谢稳定,保存时间适配常规实验周期);斜面培养物(含 X 因子的巧克力琼脂斜面)2-8℃冷藏 3 周内传代,传代需 5% CO?环境,使用前需镜检确认典型球杆状形态,并通过血琼脂培养验证 β- 溶血特性(确保表型未漂移)。

四、使用方法

  1. 复苏操作:生物安全柜内,冻干粉加 1mL 含 X 因子的巧克力肉汤溶解,37℃ 5% CO?培养箱培养 24-48 小时;待菌液浑浊、镜检见典型球杆菌,且接种血琼脂形成 β- 溶血菌落时使用(复苏成功率高,适配新手操作)。

  1. 传代培养:挑取血琼脂上具 β- 溶血的单菌落,划线接种新鲜血琼脂平板,37℃ 5% CO?培养 24-48 小时;斜面保存后 2-8℃冷藏,传代≤5 代(因表型稳定,传代次数适配常规实验需求),每次传代后需通过氧化酶试验与溶血观察验证典型特性。

  1. 应用操作:

    • 物种鉴别:用于嗜血杆菌属物种区分实验(如血琼脂溶血观察、X/V 因子依赖测试),辅助实验室建立 “溶血 + 营养因子” 双重鉴别体系,避免与流感嗜血杆菌混淆;

    • 临床质控:验证呼吸道样本鉴定系统(质谱、生化试剂盒)对副溶血性嗜血杆菌的检出准确性,确保临床样本中该菌不被漏检或误判;

    • AST 校准:校准 AST 试剂(药敏纸片、药敏板)的 MIC 值,尤其适配单因子依赖嗜血杆菌的药敏检测性能验证;

    • 教学研究:用于微生物实验教学(溶血现象观察、细菌营养需求分析),及嗜血杆菌属溶血机制基础研究,作为实验对照组菌株。


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