ATCC 51505 副流感嗜血杆菌(Haemophilus parainfluenzae)产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源:生物安全等级为 2 级(BSL-2),具条件致病性,常引发免疫低下人群呼吸道感染及口腔继发感染,操作需在生物安全柜内进行,器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床慢性支气管炎患者痰液样本,生物学特性与临床呼吸道及口腔来源分离株高度一致,可模拟自然感染状态下的定植行为,且因独特营养依赖特性易与其他嗜血杆菌区分,是多场景物种鉴别理想参照。
形态与培养特性:革兰氏阴性球杆菌,具非溶血与单因子营养依赖双重鉴别特征:
显微镜形态:菌体呈球杆状(0.4-0.6μm×1.0-1.8μm),单个或短链排列,无芽孢、无鞭毛,革兰氏染色呈均匀淡红色(易脱色,染色时间控制 20-30 秒,适配常规染色操作),无荚膜;
培养要求:兼性厌氧,需 5%-10% CO?环境,最适培养基为巧克力琼脂、含 V 因子的选择性琼脂(仅需 V 因子,无需 X 因子,区别于流感嗜血杆菌双因子依赖及副溶血性嗜血杆菌 X 因子依赖),最适温度 35-37℃,生长速度中等(24-48 小时形成明显菌落),普通营养琼脂因缺乏 V 因子不生长(可作为单因子依赖特性教学案例);
菌落形态:巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的灰白色半透明菌落(直径 0.6-1.2mm),质地柔软,挑取时易拉丝,核心特征为无溶血(接种绵羊血琼脂无溶血环,区别于具 β- 溶血的副溶血性嗜血杆菌);血琼脂上菌落形态相似,因无需 X 因子仍可生长,但无溶血现象,可通过营养因子依赖实验进一步区分。
生化与药敏特性:生化反应具物种特异性:氧化酶阳性、触酶阳性,发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖产酸不产气(蔗糖发酵阳性,区别于不发酵蔗糖的流感嗜血杆菌与副溶血性嗜血杆菌),不发酵乳糖;核心优势在于标准药敏表型:对临床常用抗菌药物(阿莫西林 / 克拉维酸、头孢曲松、左氧氟沙星)均敏感,MIC 值高度标准化(阿莫西林 / 克拉维酸 MIC 0.25-1μg/mL),无耐药基因携带,既适配 AST 方法校准,又可通过蔗糖发酵特性辅助确认物种,避免与近缘菌株混淆。
三、储存环境
未开封状态:以冻干粉(真空包装,含 10^6-10^7 CFU / 支,含 V 因子与非溶血表型保护剂)或甘油菌悬液(20% 甘油,10^5 CFU/mL,-80℃专用)供应:
冻干粉:-20℃以下冷冻保存,长期(>1 年)建议 - 80℃储存,严禁反复冻融(活菌率下降 60% 以上,破坏营养依赖特性),保质期 3 年;
甘油菌:直接 - 80℃保存,室温暴露 30 分钟致活力下降 40%,保质期 2 年,解冻后可分装少量用于短期实验(适配多次鉴别实验需求)。
复苏后状态:复苏菌液(含 V 因子的巧克力肉汤培养)2-8℃冷藏 7 天内使用(代谢稳定,保存时间适配常规实验周期);斜面培养物(含 V 因子的巧克力琼脂斜面)2-8℃冷藏 3 周内传代,传代需 5% CO?环境,使用前需镜检确认典型球杆状形态,并通过蔗糖发酵实验验证物种特性(确保表型未漂移)。
四、使用方法
复苏操作:生物安全柜内,冻干粉加 1mL 含 V 因子的巧克力肉汤溶解,37℃ 5% CO?培养箱培养 24-48 小时;待菌液浑浊、镜检见典型球杆菌,且接种巧克力琼脂形成无溶血菌落时使用(复苏成功率高,适配新手操作)。
传代培养:挑取巧克力琼脂上的单菌落,划线接种新鲜巧克力琼脂平板,37℃ 5% CO?培养 24-48 小时;斜面保存后 2-8℃冷藏,传代≤5 代(因表型稳定,传代次数适配常规实验需求),每次传代后需通过触酶试验与蔗糖发酵实验验证典型特性。
应用操作:
物种鉴别:用于嗜血杆菌属物种区分实验(如 V 因子依赖测试、蔗糖发酵实验),辅助实验室建立 “营养因子 + 生化反应” 双重鉴别体系,避免与流感嗜血杆菌、副溶血性嗜血杆菌混淆;
临床质控:验证呼吸道、口腔样本鉴定系统(质谱、生化试剂盒)对副流感嗜血杆菌的检出准确性,确保多场景临床样本中该菌不被漏检或误判;
AST 校准:校准 AST 试剂(药敏纸片、药敏板)的 MIC 值,尤其适配单因子(V 因子)依赖嗜血杆菌的药敏检测性能验证;
教学研究:用于微生物实验教学(营养因子需求分析、生化反应鉴别),及嗜血杆菌属多场景感染机制基础研究,作为实验对照组菌株。


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