ATCC 7901 聚集杆菌(Aggregatibacter aphrophilus,原嗜球菌)产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源:生物安全等级为 2 级(BSL-2),具条件致病性,可引发口腔局部感染并经血行播散至心脏引发心内膜炎(尤其人工瓣膜患者),操作需在生物安全柜内进行,器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床心内膜炎患者血液样本,生物学特性与临床口腔及全身感染分离株高度一致,可模拟自然感染状态下的聚集定植与侵袭行为,且因独特聚集生长特性易与其他杆菌区分,是分类鉴别与感染机制研究的理想参照。
形态与培养特性:革兰氏阴性球杆菌,具聚集生长与单因子营养依赖双重鉴别特征:
显微镜形态:菌体呈球杆状(0.4-0.6μm×1.0-2.0μm),核心特征为聚集生长(常呈葡萄串状或团块状排列,区别于分散生长的嗜血杆菌),无芽孢、无鞭毛,革兰氏染色呈均匀淡红色(易脱色,染色时间控制 20-30 秒,需注意观察聚集形态),无荚膜;
培养要求:兼性厌氧,需 5%-10% CO?环境促进生长,最适培养基为巧克力琼脂、哥伦比亚血琼脂(仅需 X 因子,无需 V 因子,区别于双因子依赖的流感嗜血杆菌),最适温度 35-37℃,生长速度缓慢(48-72 小时形成明显菌落),普通营养琼脂因缺乏 X 因子不生长(可作为单因子依赖与聚集生长结合的教学案例);
菌落形态:巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑黏稠、边缘不整齐的灰白色半透明菌落(直径 0.5-1.0mm),质地柔软,挑取时易拉丝且呈团块状脱落(因聚集生长特性),无溶血现象(接种绵羊血琼脂无溶血环,区别于副溶血性嗜血杆菌);菌落常因聚集生长形成 “堆叠状” 分布,是肉眼鉴别重要特征。
生化与药敏特性:生化反应具物种特异性:氧化酶阳性、触酶阴性(触酶阴性是区别于多数嗜血杆菌的关键特征),发酵葡萄糖、果糖产酸不产气,不发酵乳糖、蔗糖、麦芽糖;核心优势在于标准药敏表型:对临床常用抗菌药物(阿莫西林 / 克拉维酸、头孢曲松、克林霉素)均敏感,MIC 值高度标准化(阿莫西林 / 克拉维酸 MIC 0.25-1μg/mL),无耐药基因携带,既适配 AST 方法校准,又可通过 “触酶阴性 + 聚集生长” 双重特征快速区分于近缘的嗜血杆菌属菌株,避免分类误判。
三、储存环境
未开封状态:以冻干粉(真空包装,含 10^6-10^7 CFU / 支,含 X 因子与聚集表型保护剂)或甘油菌悬液(20% 甘油,10^5 CFU/mL,-80℃专用)供应:
冻干粉:-20℃以下冷冻保存,长期(>1 年)建议 - 80℃储存,严禁反复冻融(活菌率下降 70% 以上,破坏聚集生长与营养依赖特性),保质期 3 年;
甘油菌:直接 - 80℃保存,室温暴露 30 分钟致活力下降 50%,保质期 2 年,解冻后需一次性使用(聚集菌株反复冻融易丢失聚集特性)。
复苏后状态:复苏菌液(含 X 因子的巧克力肉汤培养)2-8℃冷藏 5 天内使用(聚集菌株代谢较敏感,需缩短保存时间);斜面培养物(含 X 因子的巧克力琼脂斜面)2-8℃冷藏 2 周内传代,传代需 5% CO?环境,使用前需镜检确认聚集生长形态,并通过触酶试验验证阴性特性(确保表型未漂移)。
四、使用方法
复苏操作:生物安全柜内,冻干粉加 1mL 含 X 因子的巧克力肉汤溶解,37℃ 5% CO?培养箱培养 48-72 小时;待菌液浑浊、镜检见团块状聚集的球杆菌,且接种巧克力琼脂形成 “堆叠状” 菌落时使用(复苏需延长培养时间,确保聚集表型恢复)。
传代培养:挑取巧克力琼脂上的聚集性单菌落(避免挑取边缘分散菌体),划线接种新鲜巧克力琼脂平板,37℃ 5% CO?培养 48-72 小时;斜面保存后 2-8℃冷藏,传代≤3 代(聚集表型易因传代次数过多丢失),每次传代后需通过显微镜观察聚集形态与触酶试验验证典型特性。
应用操作:
分类鉴别:用于聚集杆菌属与嗜血杆菌属分类区分实验(如聚集生长观察、触酶试验、X/V 因子依赖测试),辅助实验室适应细菌分类调整,建立 “形态 + 生化 + 营养” 三重鉴别体系,避免分类误判;
临床质控:验证口腔样本(牙周拭子)、血液样本鉴定系统(质谱、PCR)对聚集杆菌的检出准确性,确保临床感染样本中该菌不被漏检或误归为嗜血杆菌;
AST 校准:校准 AST 试剂(药敏纸片、药敏板)对聚集生长型细菌的 MIC 值,因聚集菌株药敏易受菌体聚集影响,需通过该标准株优化检测条件;
科研教学:用于细菌聚集机制研究(如黏附蛋白基因功能分析)、微生物分类学教学(细菌分类调整案例),及临床感染溯源研究(口腔至全身感染路径验证),作为实验对照组菌株。


客服1