ATCC 49146 副嗜血杆菌（Haemophilus paraphrophilus）产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具条件致病性，常作为口腔正常菌群成员，免疫低下时可引发局部感染并可能继发全身感染（如菌血症），操作需在生物安全柜内进行，器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床牙周炎患者牙周袋样本，生物学特性与临床口腔及呼吸道来源分离株高度一致，可模拟自然感染状态下的定植行为，且因独特营养需求易与其他嗜血杆菌区分，是物种精细鉴别理想参照。
形态与培养特性：革兰氏阴性球杆菌，具单因子营养依赖与非溶血双重鉴别特征：
显微镜形态：菌体呈球杆状（0.3-0.5μm×0.8-1.5μm），单个或成对排列（无聚集生长，区别于 ATCC7901 聚集杆菌），无芽孢、无鞭毛，革兰氏染色呈均匀淡红色（易脱色，染色时间控制 20-30 秒，适配常规染色操作），无荚膜；
培养要求：兼性厌氧，需 5%-10% CO?环境促进生长，最适培养基为巧克力琼脂、含 X 因子的选择性琼脂（仅需 X 因子，无需 V 因子，且可利用枸橼酸盐作为碳源，区别于其他单因子依赖嗜血杆菌），最适温度 35-37℃，生长速度中等（24-48 小时形成明显菌落），普通营养琼脂因缺乏 X 因子不生长（可作为 “X 因子依赖 + 枸橼酸盐利用” 联合鉴别教学案例）；
菌落形态：巧克力琼脂上呈圆形、表面光滑湿润、边缘整齐的灰白色半透明菌落（直径 0.5-1.0mm），质地柔软，挑取时易拉丝，核心特征为无溶血（接种绵羊血琼脂无溶血环，区别于副溶血性嗜血杆菌）；菌落分散均匀生长，无堆叠或聚集现象，肉眼观察易与流感嗜血杆菌混淆，需通过营养与生化特征进一步区分。
生化与药敏特性：生化反应具物种特异性：氧化酶阳性、触酶阴性（触酶阴性区别于多数嗜血杆菌，与 ATCC7901 聚集杆菌一致，但可通过枸橼酸盐利用区分），发酵葡萄糖、果糖产酸不产气，不发酵乳糖、蔗糖、麦芽糖，可利用枸橼酸盐（关键生化特征，区别于不能利用枸橼酸盐的 ATCC7901 聚集杆菌）；核心优势在于标准药敏表型：对临床常用抗菌药物（阿莫西林 / 克拉维酸、头孢曲松、克林霉素）均敏感，MIC 值高度标准化（阿莫西林 / 克拉维酸 MIC 0.25-1μg/mL），无耐药基因携带，既适配 AST 方法校准，又可通过 “X 因子依赖 + 触酶阴性 + 枸橼酸盐利用” 三重特征快速区分于近缘菌株，避免鉴别误判。
三、储存环境
未开封状态：以冻干粉（真空包装，含 10^6-10^7 CFU / 支，含 X 因子与生化表型保护剂）或甘油菌悬液（20% 甘油，10^5 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存，长期（>1 年）建议 - 80℃储存，严禁反复冻融（活菌率下降 70% 以上，破坏营养依赖与生化特性），保质期 3 年；
甘油菌：直接 - 80℃保存，室温暴露 30 分钟致活力下降 50%，保质期 2 年，解冻后需一次性使用（反复冻融易丢失枸橼酸盐利用能力）。
复苏后状态：复苏菌液（含 X 因子的巧克力肉汤培养）2-8℃冷藏 5 天内使用（生化特性敏感，需缩短保存时间）；斜面培养物（含 X 因子的巧克力琼脂斜面）2-8℃冷藏 2 周内传代，传代需 5% CO?环境，使用前需镜检确认菌体形态，并通过枸橼酸盐利用实验与触酶试验验证特性（确保表型未漂移）。
四、使用方法
复苏操作：生物安全柜内，冻干粉加 1mL 含 X 因子的巧克力肉汤溶解，37℃ 5% CO?培养箱培养 24-48 小时；待菌液浑浊、镜检见分散球杆菌，且接种巧克力琼脂形成均匀菌落时，通过枸橼酸盐利用实验确认特性后使用（复苏后需及时验证关键生化特征）。
传代培养：挑取巧克力琼脂上的单菌落，划线接种新鲜巧克力琼脂平板，37℃ 5% CO?培养 24-48 小时；斜面保存后 2-8℃冷藏，传代≤3 代（生化特性易因传代次数过多漂移），每次传代后需通过枸橼酸盐利用实验、触酶试验双重验证典型特性。
应用操作：
物种鉴别：用于嗜血杆菌属内近缘物种精细区分实验（如 X/V 因子依赖测试、触酶试验、枸橼酸盐利用实验），辅助实验室建立 “营养 + 生化 + 形态” 三重鉴别体系，解决与聚集杆菌、流感嗜血杆菌的鉴别难题；
临床质控：验证口腔样本（牙周拭子）、呼吸道样本（痰液）鉴定系统（质谱、生化试剂盒）对副嗜血杆菌的检出准确性，确保临床样本中该菌不被漏检或误归为聚集杆菌、流感嗜血杆菌；
AST 校准：校准 AST 试剂（药敏纸片、药敏板）对单因子依赖且触酶阴性嗜血杆菌的 MIC 值，因该类菌株药敏易与其他嗜血杆菌混淆，需通过标准株优化检测判读标准；
科研教学：用于细菌营养代谢研究（如 X 因子转运机制、枸橼酸盐代谢途径）、微生物鉴别学教学（近缘菌精细鉴别案例），及口腔微生态平衡研究（作为口腔正常菌群与条件致病菌双重角色研究模型），作为实验对照组菌株。
客服1