ATCC 43086 产酸克雷伯菌(Klebsiella oxytoca)产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源:生物安全等级为 2 级(BSL-2),具广谱感染倾向性,广泛存在于土壤、水及人体肠道、呼吸道等部位,免疫力低下人群(如老年人、糖尿病患者、住院患者)易发生感染,部分菌株可引发抗生素相关性出血性肠炎,操作需在生物安全柜内进行,器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床泌尿道感染患者尿液样本,生物学特性与临床常见产酸克雷伯菌分离株高度一致,其黏附泌尿道上皮细胞、形成生物膜的能力显著,可模拟临床感染中 “定植 - 致病 - 耐药” 的典型过程,是研究产酸克雷伯菌临床感染机制的理想模型。
形态与培养特性:革兰氏阴性短杆菌,具产酸特性与荚膜结构双重鉴别特征:
显微镜形态:菌体呈短杆状(0.5-1.0μm×1.0-2.0μm),单个或成对排列,无芽孢,有周生鞭毛(部分菌株鞭毛不明显,需通过动力试验确认),革兰氏染色呈均匀红色(染色时间易控制,30-60 秒即可,适配临床快速染色操作),荚膜染色可见薄荚膜环绕菌体(区别于无荚膜的大肠埃希菌);
培养要求:兼性厌氧,无需特殊 CO?环境(适配临床常规培养条件),最适培养基为麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂(EMB)及营养琼脂,最适温度 35-37℃,生长速度快(18-24 小时形成清晰菌落,适配临床快速检测需求),在普通营养琼脂上可正常生长,核心特征为产酸能力(在麦康凯琼脂上形成红色菌落,因发酵乳糖产酸使指示剂变色,区别于不发酵乳糖的沙门氏菌、志贺氏菌);
菌落形态:麦康凯琼脂上呈圆形、表面光滑黏稠、边缘整齐的红色菌落(直径 1.0-2.0mm),质地柔软,挑取时易拉丝(因荚膜多糖分泌),菌落表面具光泽;在 EMB 琼脂上呈紫黑色、带金属光泽的菌落(部分菌株光泽不明显,需结合生化反应确认),无溶血现象(接种绵羊血琼脂无溶血环,区别于溶血性链球菌);菌落易与肺炎克雷伯菌混淆,需通过产酸特性与生化反应进一步区分。
生化与药敏特性:生化反应具物种特异性:氧化酶阴性、触酶阳性,发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖产酸产气,不发酵肌醇,VP 试验阳性,甲基红试验阴性,枸橼酸盐利用试验阳性(生化结果稳定,与肺炎克雷伯菌的主要差异在于产酸强度与部分糖发酵能力,可通过生化鉴定卡快速区分);核心优势在于临床适配药敏表型:对临床常用抗菌药物(头孢曲松、左氧氟沙星、庆大霉素)敏感,对氨苄西林天然耐药(MIC≥32μg/mL,区别于对氨苄西林敏感的部分肠杆菌科菌株),MIC 值高度标准化(头孢曲松 MIC 0.25-1μg/mL),无超广谱 β- 内酰胺酶(ESBLs)携带(区别于临床耐药株),药敏结果与社区获得性产酸克雷伯菌感染治疗响应高度匹配,同时其生物膜形成能力稳定,是研究产酸克雷伯菌生物膜相关耐药的可靠模型。
三、储存环境
未开封状态:以冻干粉(真空包装,含 10^7-10^8 CFU / 支,含荚膜保护剂与产酸特性稳定剂)或甘油菌悬液(20% 甘油,10^6 CFU/mL,-80℃专用)供应:
冻干粉:-20℃以下冷冻保存,长期(>1 年)建议 - 80℃储存,严禁反复冻融(活菌率下降 50% 以上,破坏产酸特性与生物膜形成能力),保质期 5 年(因肠杆菌科菌株表型稳定,保质期长于营养依赖型菌株);
甘油菌:直接 - 80℃保存,室温暴露 30 分钟致活力下降 30%,保质期 3 年,解冻后可分装少量用于短期实验(适配临床实验室多次少量使用需求)。
复苏后状态:复苏菌液(营养肉汤培养)2-8℃冷藏 7 天内使用(肠杆菌科菌株代谢稳定,保存时间适配临床常规实验周期);斜面培养物(营养琼脂斜面)2-8℃冷藏 4 周内传代,传代无需特殊环境,使用前需镜检确认短杆状形态,并通过麦康凯琼脂产酸试验与氨苄西林药敏预实验验证特性(确保表型未漂移)。
四、使用方法
复苏操作:生物安全柜内,冻干粉加 1mL 营养肉汤溶解,37℃恒温培养箱培养 18-24 小时;待菌液浑浊、镜检见典型短杆菌,且接种麦康凯琼脂形成红色菌落时使用(复苏成功率≥98%,适配临床实验室常规操作)。
传代培养:挑取麦康凯琼脂上的红色单菌落,划线接种新鲜麦康凯琼脂平板(或营养琼脂平板),37℃培养 18-24 小时;斜面保存后 2-8℃冷藏,传代≤6 代(肠杆菌科菌株表型稳定,传代次数适配临床实验需求),每次传代后需通过触酶试验、乳糖发酵试验双重验证典型特性。
应用操作:
临床质控:用于医院检验科尿液、痰液、血液等临床样本鉴定系统(质谱仪、生化鉴定卡)的性能验证,确保临床样本中产酸克雷伯菌的快速准确检出,避免与肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌混淆;
AST 校准:校准临床常用 AST 试剂(药敏纸片、自动化药敏分析仪)的 MIC 值,制定产酸克雷伯菌感染用药指导方案(如社区获得性感染优先选择头孢曲松,避免使用氨苄西林);
感染机制研究:用于产酸克雷伯菌黏附上皮细胞(如膀胱上皮细胞、肺上皮细胞)机制研究,分析荚膜多糖、菌毛等毒力因子在感染中的作用,为新型抗感染药物研发提供模型;
教学培训:作为医学微生物实验室培训菌株,用于革兰氏染色、菌落形态观察、生化鉴定、AST 操作等基础教学,及 “肠杆菌科菌株鉴别要点” 对比教学,帮助学员掌握产酸克雷伯菌与其他肠杆菌科菌株的区分方法。


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