中文名称：单核细胞增生李斯特菌
拉丁学名：Listeria monocytogenes
标准编号：ATCCBAA751
产品形式：冻干粉（含海藻糖 - 脱脂乳 - 谷氨酸复合保护剂，降低冻干对菌体的损伤，复苏率≥90%）
安全等级：2 级（强致病性菌株，是人畜共患李斯特菌病的重要病原体，主要通过污染的即食食品、生肉、乳制品及冷链食品感染人类，孕妇、新生儿、老人及免疫缺陷人群感染后致死风险极高，需在生物安全二级实验室（BSL-2）严格按规范操作）
模式菌株：非模式菌株（为单核细胞增生李斯特菌中具有特定基因型与表型特征的菌株，在食品污染溯源、毒力机制研究及耐药性监测领域具有重要科研价值，常作为特殊研究场景的参照菌株）
分类地位：隶属于李斯特菌科、李斯特菌属，是李斯特菌属中对人类致病性最强的菌种之一，广泛存在于食品加工环境（如冷链车间、屠宰场、乳制品加工厂）、土壤、水体及生鲜食品中，因具备独特的生物学特性，成为微生物学研究领域的重要实验材料。
形态特征：菌落呈灰白色，直径 1-2mm，表面光滑湿润、边缘整齐或轻微不规则，质地黏稠且半透明，在李斯特菌选择性培养基上表现典型：PALCAM 培养基上形成黑色菌落，周围环绕清晰透明的 halo 环；Oxford 培养基上呈灰色菌落，中心为黑色，菌落形态具有较高辨识度；在血琼脂平板上形成狭窄的 β- 溶血环（与非致病李斯特菌的无溶血环、伊万诺夫李斯特菌的宽大溶血环形成关键区分，溶血特性稳定且具有菌株特异性）；菌体为革兰氏阳性短杆菌，大小约 0.5-0.8μm×1.0-2.2μm，常单个、成对或短链状排列，无芽孢，有周生鞭毛（20-25℃时运动活跃，呈 “翻筋斗” 样运动，37℃时运动能力显著减弱），革兰氏染色后显微镜下形态清晰可辨。
生理特性：兼性厌氧菌，生长温度范围极宽（-0.4-45℃，低温适应性极强，0-4℃冷藏环境下繁殖速度快，是即食冷链食品的重大安全隐患），最适生长温度 30-37℃，生长 pH 范围 4.4-9.5，耐盐性强（可在含 10% NaCl 的培养基中正常生长，且在高盐环境下仍保持致病性）；能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、鼠李糖产酸不产气，不发酵木糖、甘露醇，甲基红试验阳性，V-P 试验阳性，不产生吲哚，不分解尿素，触酶试验阳性；强致病性特征显著，携带完整的毒力基因簇（prfA调控系统、李斯特菌溶血素 O 基因hly、内化素基因inlA/inlB、磷脂酶基因plcA/plcB等），其毒力基因表达模式具有一定特异性，在宿主细胞侵袭与免疫逃逸过程中表现出独特的分子机制，感染后可引发败血症、脑膜炎、新生儿败血症及孕妇流产，感染致死率达 25%-35%。
培养条件：推荐使用李斯特菌选择性培养基（PALCAM 培养基含头孢他啶、多粘菌素 B；Oxford 培养基含吖啶黄、多粘菌素 B）或血琼脂培养基，37℃有氧培养 24-48h（普通培养箱静置培养即可，通入 5% CO?可促进菌落特征与溶血环更清晰呈现，利于菌株形态鉴别）；液体培养选用李斯特菌增菌肉汤（LEB）或 Fraser 肉汤，37℃振荡培养（转速 150-200rpm）18-24h，菌体浓度可达 10?-10??CFU/mL；若需观察运动性，建议在 22℃培养 24h，运动特征更显著。
活化步骤：需在 BSL-2 实验室生物安全柜内操作，无菌环境下开启安瓿管，用 0.5-1mL 预热至 37℃的无菌 LEB 培养基充分溶解菌粉，将菌液全部接种至血琼脂平板，37℃培养 24h 后，挑取单个具有典型狭窄 β- 溶血环的菌落，转接至 5mL Fraser 肉汤，37℃振荡培养 16h，即可获得高活性种子液（操作过程中严禁菌液飞溅，全程佩戴护目镜与无菌手套，防止气溶胶传播引发污染）。
保存方法：未启封冻干粉 2-8℃密封避光保存，有效期 5 年；复苏后斜面菌种 4℃密封保存，每 1 个月继代 1 次，有效期 1 个月（需单独存放，与非致病菌株严格隔离，存放区域张贴致病性微生物警示标识）；长期保存需将对数生长期菌液与 30% 无菌甘油按 1:1 体积比混合，快速分装至冻存管后 - 80℃冷冻保存，或真空冷冻干燥后 - 20℃保存，有效期均可达 4-5 年，严禁反复冻融（单次冻融活性损失≥25%）。
食品安全检测与科研：作为食品中单核细胞增生李斯特菌检测的特异性参照菌株，广泛用于验证新型检测方法（如数字 PCR、CRISPR-Based 检测技术）的准确性与灵敏度，支撑食品企业（如即食食品厂、冷链物流企业）及科研机构的前沿检测技术研发，符合 GB 4789.30-2022《食品安全国家标准 食品微生物学检验 李斯特菌检验》、ISO 11290-1 等国际国内标准要求；同时可用于食品加工环境中单核细胞增生李斯特菌的基因型溯源研究，助力解析污染传播链，为食品安全风险防控提供技术支撑。
临床与药物研发研究：用于临床微生物学领域的特殊病例关联研究，辅助探索单核细胞增生李斯特菌在不同宿主群体中的感染机制差异；作为抗李斯特菌新型药物（如新型抗生素、抗菌肽）的体外药效评价菌株，为药物研发提供实验模型，尤其在耐药性药物筛选中具有重要应用价值，可帮助研发人员评估药物对特殊基因型菌株的抑制效果。
微生物学基础研究：作为单核细胞增生李斯特菌毒力机制研究的特色菌株，用于探索其独特的毒力基因表达调控模式、宿主细胞相互作用机制（如与肠道上皮细胞、巨噬细胞的结合与入侵过程）及环境适应性机制，为李斯特菌病的防控策略研发提供理论基�。煌笨捎糜诟叩仍盒Ｎ⑸镅Ы资笛榻萄В镏钊肜斫獠≡幕蛐陀氡硇凸亓嵘蒲惺导芰�。
每批次产品均通过五重质量检测：纯度检测（涂布营养琼脂、李斯特菌选择性培养基及血琼脂平板，确保无杂菌污染，菌落与溶血特征典型）、活性检测（平板计数法，确保活菌数≥10?CFU / 支）、特性验证（API Listeria 生化鉴定、16S rRNA 基因测序、毒力基因（hly、inlA、prfA）检测及基因型特征确认，符合 ATCCBAA751 菌株的典型属性）、稳定性检测（37℃加速试验及 4℃冷藏试验验证保存期内活性稳定）、污染控制检测（检测噬菌体、内毒素，确保无额外生物�：Γ婊醺酱暾� COA（分析报告），质量可追溯。
操作需严格遵循《病原微生物实验室生物安全管理条例》，仅限经专业培训并考核合格的实验人员在 BSL-2 实验室操作，穿戴无菌手套、防护口罩、护目镜及实验服，全程在生物安全柜内处理菌液；实验废弃物（含菌培养基、耗材、防护用品）需经 121℃高压蒸汽灭菌 60min 后处理；若发生菌液泄漏，需立即启动应急方案，用 1000mg/L 含氯消毒剂覆盖污染区域并作用 60 分钟，通风 30 分钟以上，暴露人员需立即清洗消毒并进行医学观察 7 天；收货后 24 小时内，若发现安瓿管破损、菌粉变色或复苏后无典型致病特征菌落，需在生物安全柜内妥善处理破损品，并按致病性微生物运输规范联系售后办理退换货。
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