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ATCC27853铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa WDCM 00025

一、菌种基础信息中文名称:铜绿假单胞菌拉丁学名:Pseudomonas aeruginosa标准编号:ATCC27853(WDCM 00025,世界微生物数据中心官方认证标准化菌株,为全球抗生素敏感性试验(AST)的 “金标准” 质控菌株)产品形式:冻干菌体(含脱脂乳 - 葡萄糖 - 镁盐 - 缓冲盐复合保护剂,专为 AST 质控设计,确保药敏结果稳定性、生

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一、菌种基础信息
  • 中文名称:铜绿假单胞菌

  • 拉丁学名:Pseudomonas aeruginosa

  • 标准编号:ATCC27853(WDCM 00025,世界微生物数据中心官方认证标准化菌株,为全球抗生素敏感性试验(AST)的 “金标准” 质控菌株)

  • 产品形式:冻干菌体(含脱脂乳 - 葡萄糖 - 镁盐 - 缓冲盐复合保护剂,专为 AST 质控设计,确保药敏结果稳定性、生化特性一致性及高复苏率,复苏率≥95%,远超非标准化菌株)

  • 安全等级:2 级(非致病性标准质控菌,分离自环境样本,无临床致病性,仅用于实验室质量控制与方法验证,免疫正常人群无感染风险,BSL-2 实验室常规操作即可)

  • 模式菌株:官方认证 AST 标准质控菌株(WDCM 00025),是铜绿假单胞菌属中药敏特性最稳定的菌株,因药敏结果精确可控、遗传背景清晰、无外源耐药基因,为临床微生物实验室 AST 质量控制、体外诊断(IVD)试剂校准、国际药敏方法标准化的核心参照

  • 分类地位:隶属于假单胞菌科、假单胞菌属,革兰氏阴性杆菌,需氧,在全球临床微生物 AST 质量控制、药敏方法标准化及抗菌药物研发中具有不可替代的权威地位。

二、核心生物学特性
  1. 形态与生理:

  • 菌落:营养琼脂上 35-37℃培养 24h,呈 “典型非黏液型蓝绿色菌落”(核心差异特征,表面湿润但无黏液层,区别于 ATCC25619 的黏液型菌落),直径 1.2-1.8mm(小于 ATCC25619),边缘整齐(锯齿状不明显,ATCC25619 边缘不规则);血琼脂上产生标准 β- 溶血(溶血范围精确可控,直径 2.5-3.0mm,可作为溶血试验质控指标,ATCC25619 溶血范围波动较大);不发酵葡萄糖(氧化型代谢,与 ATCC25619 一致),利用柠檬酸盐能力标准化(30±2h 内使培养基变色,ATCC25619 为 24h 内快速变色)。

  • 菌体:革兰氏阴性杆菌(0.5-0.9μm×1.5-2.8μm,大小均一无波动,ATCC25619 略大且存在个体差异),无芽孢,有 1-2 根极生鞭毛(运动性适中,液体培养中呈均匀浑浊,无黏液状沉淀,ATCC25619 因黏液分泌呈黏液状浑浊);氧化酶阳性、触酶阳性(反应结果即时显阳性,无假阴性 / 假阳性,ATCC25619 反应速度略慢);产绿脓素与荧光素能力标准化(培养基蓝绿色深度一致,紫外灯下荧光强度稳定,可作为色素合成试验质控,ATCC25619 色素合成更强);不产生硫化氢,吲哚试验阴性(与 ATCC25619 一致);无需特殊生长因子,在标准培养基上生长速率精确(24h 菌落直径误差≤0.2mm,ATCC25619 生长速率波动较大)。

  • 特性:严格需氧(与 ATCC25619 一致),最适生长温度 35±1℃(温度敏感性标准化,偏离 1℃即出现生长速率变化,可作为培养温度质控,ATCC25619 耐温范围更广);生长 pH 5.5-8.5(pH 耐受性精确可控,可作为培养基 pH 质控指标,ATCC25619 耐酸范围略宽);药敏结果全球统一(对庆大霉素、头孢他啶、亚胺培南、左氧氟沙星、哌拉西林等 12 种常用抗菌药物的 MIC 值(最小抑菌浓度)符合 CLSI(美国临床实验室标准化协会)、EUCAST(欧洲抗菌药物敏感性试验委员会)全球统一标准,ATCC25619 仅对 4 种药物敏感且无统一 MIC 标准);生物膜形成能力弱(仅形成薄而松散的生物膜,可作为生物膜抑制试验阴性对照,ATCC25619 生物膜形成能力极强)。

三、培养与保存
  • 培养:必须使用符合 CLSI 标准的营养琼脂 / 肉汤(推荐 BD Difco、Oxoid 等国际品牌标准培养基,避免非标准培养基影响药敏结果,ATCC25619 可使用普通培养基),35±1℃有氧培养 24±1h(培养条件严格标准化,温度、时间误差均需≤1%,ATCC25619 培养条件宽容度高);液体培养用标准 Mueller-Hinton 肉汤(AST 专用培养基),35℃振荡培养(150±5rpm,转速精确控制)16-18h,菌体浓度达(5.0±0.5)×10?CFU/mL(浓度精确到对数级,可直接用于 AST 菌悬液制备,ATCC25619 浓度波动范围 ±1.0×10?CFU/mL),菌液呈均匀蓝绿色浑浊(无黏液、无沉淀,ATCC25619 呈黏液状浑浊)。

  • 保存:冻干品 2-8℃密封保存 7 年(因标准化保护剂配方,有效期远超 ATCC25619 的 4 年);复苏后斜面 4℃保存 3 个月(稳定性极强,继代间隔长于 ATCC25619 的 1.5 个月),每 4 周继代 1 次(可连续继代 10 次仍保持药敏结果不变,ATCC25619 继代 5 次后可能出现特性波动);长期保存推荐液氮冷冻(含 15% 甘油 - 0.1% 镁盐,按 0.5mL / 支标准化分装,避免反复冻融),有效期 7 年,药敏结果、生化特性保留率≥99.9%(ATCC25619 保留率≥85%)。

四、应用与安全
  • 应用:临床微生物实验室 AST 质量控制(每日 AST 试验前需用该菌株验证检测系统,确保 MIC 值在 CLSI 标准范围内,ATCC25619 无此质控功能);体外诊断(IVD)药敏试剂研发与校准(作为药敏试纸、药敏板的出厂校准菌株,确保试剂全球检测结果一致,ATCC25619 仅用于研发初期验证);国际药敏方法标准化(参与 CLSI、EUCAST 等国际标准方法的制定与更新,如 CLSI M100 文件中铜绿假单胞菌药敏标准即基于该菌株,ATCC25619 无此权威地位);微生物实验室能力验证(作为室间质评(EQA)样本,评估全球不同实验室的 AST 检测准确性,ATCC25619 仅用于内部能力验证);抗菌药物研发(作为新药体外药敏试验的标准对照,确保不同研发阶段药敏数据可比,ATCC25619 仅用于药物筛选阶段)。

  • 安全:BSL-2 实验室超净工作台或生物安全柜常规操作(无需特殊防护,ATCC25619 需防范黏液交叉污染);实验器具需专用(避免与其他菌株交叉污染,影响药敏结果,ATCC25619 无此严格要求);废弃物 121℃高压灭菌 30min 即可(无致病性,无需延长灭菌时间,ATCC25619 灭菌要求一致);若发生菌液泄漏,用 1000mg/L 含氯消毒剂擦拭处理(浓度低于 ATCC25619 的 1500mg/L);暴露者无需医学监测(无致病性,仅需常规清洁);实验后需记录菌株使用批号、培养条件及药敏结果(符合实验室质控追溯要求,ATCC25619 无强制追溯要求),适配全球各级临床微生物实验室、IVD 企业及药物研发机构的标准化质控场景。



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