中文名称:恶臭假单胞菌
拉丁学名:Pseudomonas putida
标准编号:ATCC49128
产品形式:冻干菌体(含脱脂乳 - 葡萄糖 - 有机酸复合保护剂,适配其广谱碳源代谢特性,保留污染物降解能力与活性,复苏率≥85%)
安全等级:1 级(非致病性环境功能菌株,主要分离自石油污染土壤、工业废水环境,无临床感染能力,核心用于环境污染物降解、工业发酵研究,BSL-1 实验室常规操作即可)
模式菌株:非模式菌株,是恶臭假单胞菌属中降解功能突出的代表菌株,因碳源利用广谱、污染物降解效率稳定,为环境修复工程、工业生物技术研究的核心参照菌株
分类地位:隶属于假单胞菌科、假单胞菌属,革兰氏阴性杆菌,需氧,在环境污染物治理、工业生物催化及微生物代谢工程研究中具有重要应用价值。
形态与生理:
菌落:营养琼脂上 30-32℃培养 24h(最适温度略高于 ATCC13525 的 28-30℃),呈 “非黏液型乳白色菌落”(区别于 ATCC13525 的淡黄色),直径 1.2-1.6mm,表面光滑、边缘整齐;培养过程散发特殊芳香气味(核心鉴别特征,类似水果香味,ATCC13525 无此气味);紫外灯下无荧光(与 ATCC13525 的强烈蓝白色荧光差异显著);血琼脂上无溶血(与 ATCC13525 一致,区别于铜绿假单胞菌的溶血特性);不发酵葡萄糖,可利用多种复杂碳源(如芳香族化合物、石油烃、有机酸,ATCC13525 碳源利用范围较窄),柠檬酸盐利用能力强(36h 内变色,快于 ATCC13525 的 48h)。
菌体:革兰氏阴性杆菌(0.5-0.8μm×1.3-2.5μm,略大于 ATCC13525),极生 2-4 根鞭毛(运动性强于 ATCC13525,液体培养中扩散更快);氧化酶、触酶阳性(与 ATCC13525 一致);不产绿脓素与荧光素(培养基无色素变化,与 ATCC13525、铜绿假单胞菌的色素特性均差异显著);无耐药基因(对氨苄西林、庆大霉素、四环素均敏感,耐药谱与 ATCC13525 一致)。
特性:严格需氧,耐污染环境能力强(可在含 100mg/L 石油烃的培养基中正常生长,ATCC13525 耐受浓度仅为 50mg/L);生长 pH 4.5-8.5(耐酸范围宽于 ATCC13525 的 5.0-8.0);生物膜形成能力强(可在载体表面形成致密生物膜,提升污染物降解效率,ATCC13525 生物膜能力中等);污染物降解效率高(对苯、甲苯、萘等芳香族化合物降解率达 90% 以上,ATCC13525 无此高效降解能力)。
培养:用环境功能菌专用培养基(如含少量石油烃的 LB 培养基,诱导降解酶表达),30±1℃有氧培养 24±2h;液体培养用营养肉汤(添加 0.1% 葡萄糖 + 0.05% 苯甲酸),30℃振荡培养(140rpm,适配强运动性)18-20h,菌体浓度达(7.0±1.0)×10?CFU/mL(高于 ATCC13525),菌液呈乳白色透明浑浊(无色素,ATCC13525 为淡黄色浑浊)。
保存:冻干品 2-8℃保存 4 年(短于 ATCC13525 的 5 年,因降解功能蛋白易失活);复苏后斜面 4℃保存 2 个月(与 ATCC13525 的 3 个月略短),每 3 周继代 1 次(需定期用污染物培养基验证降解能力,ATCC13525 无需功能验证);长期液氮冷冻(15% 甘油 + 0.05% 有机酸),有效期 4 年,碳源代谢能力与污染物降解活性保留率≥85%。
应用:环境污染物治理(用于石油污染土壤、工业废水生物修复,降解芳香族化合物、石油烃等污染物);工业生物催化(作为生物催化剂生产有机酸、生物表面活性剂,替代化学合成工艺);微生物代谢工程(改造其代谢途径,提升特殊污染物降解效率);环境监测(作为工业废水污染程度的指示菌株,评估水质修复效果,ATCC13525 适配食品与常规环境监测)。
安全:BSL-1 实验室超净工作台操作,无需特殊防护;培养过程需注意通风(避免芳香气味积聚);废弃物 121℃灭菌 20min 即可;泄漏用 1000mg/L 含氯消毒剂处理;暴露者无需医学监测,无致病风险与耐药基因扩散问题,适配环境工程、工业生物领域的研究与应用场景。


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