中文名称：铜绿假单胞菌

拉丁学名：Pseudomonas aeruginosa

标准编号：ATCC25668（WDCM 00114，世界微生物数据中心认证标准化菌株，为微生物检测方法验证与质量控制的 “权威参照菌”）

产品形式：冻干菌体（含脱脂乳 - 葡萄糖 - 镁盐 - 磷酸盐复合保护剂，专为标准化质控设计，确保产色素能力、生化特性及药敏结果长期稳定，复苏率≥95%，远超非标准化菌株）

安全等级：2 级（非致病性标准质控菌，分离自环境样本，无临床感染能力，仅用于实验室方法验证、培养基性能评估及 AST（抗生素敏感性试验）基础质控，BSL-2 实验室常规操作即可）

模式菌株：官方认证检测标准菌株（WDCM 00114），是铜绿假单胞菌属中检测特性最典型的菌株，因生化反应清晰、遗传背景明确、无外源耐药基因，为全球微生物实验室检测方法校准、体外诊断试剂性能验证的核心参照

分类地位：隶属于假单胞菌科、假单胞菌属，革兰氏阴性杆菌，需氧，在临床微生物检测标准化、体外诊断试剂研发及微生物实验室能力验证中具有不可替代的权威价值。

菌落：营养琼脂上 35-37℃培养 24h（需有氧环境，区别于黑色素普雷沃菌的严格厌氧培养），呈 “典型非黏液型蓝绿色菌落”（核心鉴别特征，因产生绿脓素与荧光素，区别于黑色素普雷沃菌的黑色菌落），直径 1.2-1.8mm，表面湿润、边缘呈锯齿状，无黏液层（与黑色素普雷沃菌的柔软光滑菌落差异显著）；血琼脂上产生标准 β- 溶血（溶血范围直径 2.5-3.0mm，可作为溶血试验质控指标，黑色素普雷沃菌仅弱 β- 溶血）；不发酵葡萄糖（氧化型代谢，与黑色素普雷沃菌的发酵代谢完全相反），能高效利用柠檬酸盐（24-30h 内使培养基由绿变蓝，反应速度稳定，黑色素普雷沃菌无柠檬酸盐利用能力）。

菌体：革兰氏阴性杆菌（0.5-1.0μm×1.5-3.0μm，略大于黑色素普雷沃菌），无芽孢，有 1-2 根极生鞭毛（运动性强，液体培养中呈均匀浑浊，黑色素普雷沃菌无鞭毛不运动）；氧化酶阳性、触酶阳性（反应结果即时显强阳性，无延迟，黑色素普雷沃菌触酶阴性，核心差异指标）；产色素能力标准化（绿脓素与荧光素产量稳定，培养基蓝绿色深度一致，紫外灯下荧光强度精确可控，可作为色素合成试验质控标准，黑色素普雷沃菌仅产黑色素）；不产生硫化氢，吲哚试验阴性（与黑色素普雷沃菌一致，但代谢途径完全不同）；无耐药基因（对庆大霉素、头孢他啶、亚胺培南、左氧氟沙星等 8 种常用抗菌药物的 MIC 值（最小抑菌浓度）符合 CLSI（美国临床实验室标准化协会）全球统一标准，黑色素普雷沃菌仅对口腔感染相关抗生素敏感）。

特性：严格需氧（氧分压低于 10% 时生长显著受限，与黑色素普雷沃菌的氧分压＞0.1% 即抑制生长特性完全相反）；最适生长温度 35±1℃（温度敏感性标准化，偏离 1℃即出现生长速率变化，可作为培养温度质控指标，黑色素普雷沃菌适配 35-37℃口腔温度但无严格温度质控要求）；生长 pH 5.0-9.0（耐酸耐碱范围宽且精确可控，可作为培养基 pH 校准标准，黑色素普雷沃菌生长 pH 6.5-7.5，范围较窄）；生物膜形成能力弱（仅形成薄而松散的生物膜，可作为生物膜抑制试验阴性对照，黑色素普雷沃菌参与口腔生物膜形成，能力显著更强）；检测特性稳定（革兰氏染色结果清晰、生化反应无假阳性 / 假阴性，可作为微生物形态学与生化检测的 “标准样本”，黑色素普雷沃菌无此广泛检测适配性）。

培养：必须使用符合 ISO 标准的营养琼脂 / 肉汤（推荐 BD Difco、Oxoid 等国际品牌标准培养基，避免非标准培养基影响特性稳定性，黑色素普雷沃菌可使用口腔厌氧菌专用培养基），35±1℃有氧培养 24±1h（培养条件严格标准化，温度、时间误差均需≤1%，黑色素普雷沃菌培养时间 48-72h 且条件宽容度高）；液体培养用标准 Mueller-Hinton 肉汤（AST 专用培养基），35℃振荡培养（150±5rpm，转速精确控制）16-18h，菌体浓度达（5.0±0.5）×10?CFU/mL（浓度精确到对数级，可直接用于 AST 菌悬液制备，黑色素普雷沃菌浓度波动范围 ±1.0×10?CFU/mL），菌液呈均匀蓝绿色浑浊（因绿脓素溶解，无沉淀，黑色素普雷沃菌菌液呈棕褐色浑浊）。

保存：冻干品 2-8℃密封保存 7 年（因标准化保护剂配方，有效期远超黑色素普雷沃菌的 3 年）；复苏后斜面 4℃保存 3 个月（稳定性极强，继代间隔长于黑色素普雷沃菌的 1 个月），每 4 周继代 1 次（可连续继代 10 次仍保持所有特性不变，黑色素普雷沃菌继代 2 次后需验证产黑色素能力）；长期保存推荐液氮冷冻（含 15% 甘油 - 0.1% 镁盐，按 0.5mL / 支标准化分装，避免反复冻融），有效期 7 年，生化特性、产色素能力及药敏结果保留率≥99.9%（黑色素普雷沃菌保留率≥85%）。

应用：临床微生物检测方法标准化（参与 ISO、CLSI 等国际检测标准的制定与更新，如微生物计数、分离纯化方法的验证标准即基于该菌株，黑色素普雷沃菌仅适配口腔微生物检测）；体外诊断（IVD）试剂性能验证（作为生化鉴定试纸、微生物检测试剂盒的出厂性能校准菌株，确保试剂全球检测结果一致性，黑色素普雷沃菌无此广泛试剂适配性）；微生物实验室能力验证（作为室间质评（EQA）样本，评估全球不同实验室的检测准确性，黑色素普雷沃菌仅用于口腔专项能力验证）；培养基性能评估（测试培养基的无菌性、促生长能力及选择性，可同时验证需氧菌培养体系有效性，黑色素普雷沃菌仅用于厌氧培养基评估）；AST 方法基础验证（验证药敏试验操作流程的正确性，为临床 AST 结果准确性提供基础保障，黑色素普雷沃菌无 AST 质控功能）。

安全：BSL-2 实验室超净工作台或生物安全柜常规操作（无需特殊防护，黑色素普雷沃菌需厌氧操作防护）；实验器具需专用（避免与其他菌株交叉污染，影响检测结果准确性，黑色素普雷沃菌无此严格要求）；废弃物 121℃高压灭菌 30min 即可（无致病性，无需延长灭菌时间，黑色素普雷沃菌灭菌要求一致）；若发生菌液泄漏，用 1000mg/L 含氯消毒剂擦拭处理（浓度低于黑色素普雷沃菌的 2000mg/L）；暴露者无需医学监测（无致病性，仅需常规清洁）；实验后需记录菌株使用批号、培养条件及检测结果（符合实验室质控追溯要求，黑色素普雷沃菌无强制追溯要求），适配全球各级临床微生物实验室、IVD 企业及检测机构的标准化质控场景。