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ATCC49136肺炎链球菌Streptococcus pneumoniae

ATCC49136 肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)产品说明一、菌株基础信息本品对应菌株为 ATCC49136 肺炎链球菌,隶属于链球菌科链球菌属,是经 ATCC(美国典型培养物保藏中心)严格执行标准化鉴定流程并专业保藏的标准菌株。该菌株遗传背景清晰,遗传特性长期稳定,生物学特征经多轮验证无偏差,作为人类呼吸道致病性链

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ATCC49136 肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)产品说明

一、菌株基础信息

本品对应菌株为 ATCC49136 肺炎链球菌,隶属于链球菌科链球菌属,是经 ATCC(美国典型培养物保藏中心)严格执行标准化鉴定流程并专业保藏的标准菌株。该菌株遗传背景清晰,遗传特性长期稳定,生物学特征经多轮验证无偏差,作为人类呼吸道致病性链球菌的典型代表,是微生物领域肺炎链球菌致病机制研究、疫苗效能评估及临床检测质量控制的核心参照菌株。其专属菌株编号具有全球唯一性,可实现实验全程溯源,保障不同实验室、不同批次实验结果的精准比对,为肺炎链球菌相关科研项目与临床检测工作的可靠性提供核心支撑。

二、生物学特性

形态特征

该菌株为革兰氏阳性球菌,显微镜下呈典型矛头状或圆形,以双球菌排列为主要形态(两个菌体相对侧扁平,形似 “瓜子仁”),少数情况下呈短链状排列,短链多由 2-3 个细胞组成,链长极少超过 4 个细胞。菌株无芽孢、无鞭毛,无法自主运动,所有菌体均包裹明显荚膜,荚膜厚度均匀,通过墨汁负染法可清晰观察到荚膜形成的透明晕环。在含 5% 绵羊血的血琼脂平板上培养后,形成的菌落呈灰白色、半透明状,质地柔软且富有光泽,菌落边缘整齐无锯齿,直径约 0.6-1.6mm,多数菌株表现为典型 α- 溶血,即菌落周围形成狭窄、均匀的草绿色溶血环;培养超过 24 小时后,部分菌落因自溶酶作用,中心会出现轻微凹陷,这一形态特征是区分该菌株与其他链球菌的重要依据。

生理生化特性

该菌株为兼性厌氧微生物,最适生长温度与人体体温一致,处于 35-37℃区间,最适 pH 值为 7.3-7.8,生长过程对 CO?具有依赖性,需在 5%-10% CO?环境中培养,若置于普通大气环境,菌株生长缓慢且菌落形态畸形,溶血特性不明显。糖类发酵方面,可高效发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、菊糖,发酵过程仅产酸不产气;对甘露醇、山梨醇、木糖无发酵能力,不分解淀粉等多糖类物质。生化反应试验中,触酶试验、氧化酶试验、精氨酸双水解酶试验及 VP 试验均呈阴性,可有效水解七叶苷;能合成并分泌自溶酶,在酸性环境(pH<6.0)或培养后期,自溶酶会导致菌体破裂;对奥普托欣(Optochin)高度敏感,在含 5μg 奥普托欣的培养基上,菌株生长会被完全抑制,这一特性是鉴别该菌株与口腔链球菌等近缘菌株的关键指标。

三、培养与保存条件

培养条件

推荐使用含 5% 绵羊血或兔血的血琼脂培养基进行培养,该培养基可满足菌株生长所需的营养物质,同时能充分展现其溶血特性。接种时采用划线接种法,接种后将培养基置于 35-37℃、含 5%-10% CO?的培养箱内,培养 18-22 小时,CO?环境可促进荚膜合成与溶血环形成,避免因 CO?浓度不足导致的生长异常。若需扩大培养,可选用添加 1% 酵母提取物的脑心浸液肉汤(BHI 肉汤),在与固体培养相同的温度和气体环境下,采用静态培养或低速振荡培养(100-110rpm),培养 20-22 小时后,菌液浓度可达到 10?-10?CFU/mL,且能最大程度保留菌株的荚膜形成能力与致病性相关特性。培养过程中需避免温度波动超过 ±1℃,同时控制传代次数(建议不超过 4 代),防止菌株因传代过多导致荚膜丢失或毒力减弱。

保存条件

短期保存(1-2 周)时,需将培养至对数生长期的菌株接种至血琼脂斜面培养基,置于 35-37℃、5%-10% CO?培养箱中培养 16 小时,待菌落形成后,立即转移至 4℃冰箱冷藏保存,冷藏期间每 4 天观察一次菌株状态,若发现菌落出现自溶或污染迹象,需及时重新接种。长期保存建议采用冷冻干燥保存法,取对数生长期菌液,与含 0.5% 酵母提取物的 20% 甘油保护剂(或 10% 脱脂乳保护剂)按 1:1 体积比充分混合,分装至无菌冷冻管(每管 1mL),经梯度降温处理(-20℃预冻 4 小时,再转入 - 80℃冷冻 8 小时)后进行冷冻干燥。干燥完成后,将冷冻管置于 - 80℃冰箱或液氮中保存,保存期限可达 4-6 年。长期保存期间,建议每 12 个月复苏一次菌株,复苏后通过形态观察(重点检查荚膜完整性)、奥普托欣敏感性试验、菊糖发酵试验及溶血特性检测,验证菌株纯度与生理活性,确保后续使用性能稳定。

四、应用领域

致病机制研究

作为致病性明确的肺炎链球菌标准菌株,ATCC49136 是研究肺炎链球菌致病机制的核心材料。可用于解析菌株荚膜的抗吞噬机制(荚膜为主要毒力因子)、毒力因子(如肺炎链球菌溶血素、神经氨酸酶、肺炎球菌表面蛋白 A)的表达调控规律,以及菌株在呼吸道黏膜的定植、黏附与侵袭过程;同时可用于探究宿主免疫系统(如补体系统、巨噬细胞、T 淋巴细胞)对菌株的识别与清除机制,为肺炎、脑膜炎、败血症等肺炎链球菌感染性疾病的防控策略研究提供基础数据支持。

疫苗与诊断试剂研发

在肺炎链球菌疫苗研发领域,该菌株可用于多糖疫苗、蛋白结合疫苗的抗原性检测,通过 ELISA 等方法评估疫苗诱导机体产生特异性抗体的水平,以及抗体对菌株的中和能力;同时可作为疫苗生产过程中的质量控制菌株,验证疫苗的纯度、稳定性及安全性。在诊断试剂领域,可用于肺炎链球菌核酸检测试剂盒、抗原检测试剂盒的研发与性能验证,检测试剂的灵敏度、特异性与批间一致性,确保临床可通过该试剂快速、准确诊断肺炎链球菌感染,为早期治疗提供依据。

临床微生物检测与抗菌药物研究

在临床微生物实验室,该菌株可用于技术人员的技能培训,帮助人员熟练掌握肺炎链球菌的分离、培养、鉴定流程(如奥普托欣试验、荚膜染色、生化反应验证),提升临床样本中肺炎链球菌的检出准确率。此外,可作为抗菌药物敏感性试验的标准菌株,检测青霉素、头孢曲松、左氧氟沙星、阿奇霉素等临床常用抗菌药物对肺炎链球菌的最小抑菌浓度(MIC),为临床医生制定个性化抗感染治疗方案提供参考,避免因盲目用药导致耐药菌株产生。

五、安全注意事项

该菌株为人类致病性微生物,可通过呼吸道飞沫、接触污染样本等途径传播,引发肺炎、脑膜炎、败血症等严重感染性疾病,操作时需严格遵守生物安全二级(BSL-2)实验室操作规程。操作人员需佩戴无菌手套、医用外科口罩、护目镜,必要时穿戴一次性防护服;所有接种、菌液转移、离心、染色等操作均需在生物安全柜内完成,避免产生含菌气溶胶。
实验废弃物需分类处理:使用过的菌液、培养基、接种环等,需装入专用高压灭菌袋,经 121℃、30 分钟高压蒸汽灭菌后再丢弃;一次性防护用品(如手套、口罩)需单独收集,灭菌后按医疗废弃物处理;染色后的玻片需浸泡在含 0.5% 次氯酸钠溶液中消毒 30 分钟,再清洗烘干。实验台面、生物安全柜内壁、培养箱等仪器设备,使用后需用 0.5% 次氯酸钠溶液或 0.3% 过氧乙酸溶液擦拭消毒,作用 30 分钟后用无菌水擦拭干净;实验室每周需进行一次空气消毒,可采用紫外线照射(照射时间≥60 分钟)或过氧化氢熏蒸法。
菌株需由专人管理,建立 “双人双锁” 储存制度,领用需填写《菌株领用登记表》,详细记录领用人员、领用时间、领用数量、使用用途及归还情况。严禁将菌株转让给未具备 BSL-2 实验室资质的单位或个人,不得擅自扩大培养或用于非科研、检测目的。若发生菌株泄漏(如菌液泼洒、培养皿破碎),需立即关闭生物安全柜,隔离污染区域,用浸有 0.5% 次氯酸钠溶液的纱布覆盖污染表面,作用 30 分钟后清理;若人员意外接触菌株(如皮肤破损处接触菌液、吸入含菌气溶胶),需立即用生理盐水冲洗接触部位,皮肤接触者需涂抹碘伏消毒,黏膜接触或吸入者需及时就医,并上报实验室负责人与当地疾控部门,按要求开展追踪观察与预防性治疗。


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