ATCC49619 肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）产品说明
一、菌株基础信息
本品对应菌株为 ATCC49619 肺炎链球菌，隶属于链球菌科链球菌属，是经 ATCC（美国典型培养物保藏中心）通过基因测序、生化特征验证、血清型鉴定等多维度标准化流程鉴定，并采用专业保藏技术留存的标准菌株。该菌株遗传背景清晰，经长期传代监测显示遗传特性稳定无变异，生物学特征具有高度可重复性，作为人类呼吸道致病性肺炎链球菌的代表性菌株，是微生物领域肺炎链球菌血清型相关研究、耐药机制分析、临床诊断试剂验证及疫苗质量控制的核心参照菌株。其专属菌株编号具备全球唯一性，可实现从菌株获取、实验操作到结果溯源的全流程追踪，有效保障不同实验室、不同批次实验数据的精准比对，为肺炎链球菌相关科研项目的严谨性与临床检测工作的可靠性提供关键支撑。
二、生物学特性
形态特征
该菌株为革兰氏阳性球菌，显微镜下呈典型矛头状或圆形，以双球菌为主要排列形态（两个菌体相对侧扁平，呈 “瓜子仁” 样结构），少数情况下呈短链状排列，短链多由 2-3 个细胞组成，极少出现超过 4 个细胞的长链。菌株无芽孢生成，不具备鞭毛结构，无法自主运动，所有菌体均包裹完整且厚度均匀的荚膜，通过墨汁负染法观察，可清晰看到荚膜围绕菌体形成的透明晕环，晕环宽度约为菌体直径的 1/4-1/3。在含 5% 绵羊血的血琼脂平板上培养后，形成的菌落呈灰白色、半透明状，质地柔软且表面光滑有光泽，菌落边缘整齐无锯齿，直径约 0.6-1.7mm，多数菌株表现为典型 α- 溶血，即菌落周围形成狭窄且均匀的草绿色溶血环；培养超过 24 小时后，部分菌落因自溶酶活性增强，中心会出现轻微凹陷，这一形态特征是区分该菌株与口腔链球菌、缓症链球菌等近缘菌株的重要依据。
生理生化特性
该菌株为兼性厌氧微生物，最适生长温度与人体正常体温一致，处于 35-37℃区间，最适 pH 值为 7.3-7.8，生长过程对 CO?存在严格依赖性，需在 5%-10% CO?环境中培养，若置于普通大气环境（无额外 CO?补充），菌株生长速度显著减缓，菌落形态会出现畸形（如边缘不规则、透明度降低），且溶血特性减弱甚至消失。糖类发酵方面，可高效发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、菊糖，发酵过程仅产生酸性物质（主要为乳酸），不产生气体；对甘露醇、山梨醇、木糖、阿拉伯糖无发酵能力，且不能分解淀粉、糖原等多糖类物质。生化反应试验中，触酶试验、氧化酶试验、精氨酸双水解酶试验及 VP 试验结果均为阴性，可高效水解七叶苷；能合成并分泌自溶酶，在酸性环境（pH<5.9）或培养后期（超过 28 小时），自溶酶会促使菌体破裂溶解；对奥普托欣（Optochin）具有高度敏感性，在含 5μg 奥普托欣的血琼脂培养基上，菌株生长会被完全抑制，形成明显抑菌圈（直径≥13mm），这一特性是鉴别该菌株与其他链球菌的关键指标。
三、培养与保存条件
培养条件
推荐使用含 5% 绵羊血或兔血的血琼脂培养基进行培养，该培养基可为菌株生长提供充足的蛋白质、维生素及生长因子，同时能充分展现其 α- 溶血特性。接种时采用分区划线接种法，确保菌落分离均匀，接种后将培养基置于 35-37℃、含 5%-10% CO?的恒温培养箱内，培养 18-22 小时，CO?环境可促进菌株荚膜的合成与稳定，保障溶血环清晰形成，避免因 CO?浓度不足导致的生长异常。若需扩大培养，可选用添加 1.0% 酵母提取物的脑心浸液肉汤（BHI 肉汤），在与固体培养相同的温度和气体环境下，采用静态培养或低速振荡培养（80-100rpm），培养 18-22 小时后，菌液浓度可达到 10?-10?CFU/mL，且能最大程度保留菌株的荚膜完整性与致病性相关特性。培养过程中需严格控制温度波动范围（不超过 ±1℃），同时限制传代次数（建议不超过 3 代），防止菌株因频繁传代导致荚膜丢失、毒力减弱或生化特性改变。
保存条件
短期保存（1-2 周）时，需选取培养至对数生长期（培养 16-18 小时）的菌株，接种至血琼脂斜面培养基，置于 35-37℃、5%-10% CO?培养箱中培养 14-16 小时，待菌落均匀形成后，立即转移至 4℃冰箱冷藏保存，冷藏期间每 3-4 天观察一次菌株状态，若发现菌落出现自溶、变色或污染迹象，需及时重新接种培养。长期保存建议采用冷冻干燥保存法，取对数生长期菌液，与含 0.5% 酵母提取物的 20% 甘油保护剂（或 10% 脱脂乳保护剂）按 1:1 体积比充分混匀，分装至无菌冷冻管（每管 0.8-1mL），经梯度降温处理（-20℃预冻 4 小时，再转入 - 80℃冷冻 8 小时）后进行冷冻干燥。干燥完成后，将冷冻管置于 - 80℃冰箱或液氮（-196℃）中保存，保存期限可达 4-6 年。长期保存期间，建议每 12 个月复苏一次菌株，复苏后通过形态观察（重点检查荚膜完整性与排列方式）、奥普托欣敏感性试验（检测抑菌圈直径）、菊糖发酵试验及溶血特性检测，全面验证菌株纯度与生理活性，确�：笮褂檬本晷阅芪榷�。
四、应用领域
血清型与耐药机制研究
作为血清型特征明确的肺炎链球菌标准菌株，ATCC49619 是深入研究肺炎链球菌血清型分布规律、血清型与致病性关联的核心材料，可用于开发血清型特异性检测方法（如乳胶凝集试验、PCR 分型）。同时，该菌株可用于肺炎链球菌耐药机制研究，分析耐药基因（如青霉素结合蛋白编码基因 pbp2x、pbp2b）的突变规律、耐药表型与基因型的对应关系，为临床耐药菌株的监测与防控提供实验依据。
疫苗与诊断试剂研发
在肺炎链球菌疫苗研发领域，该菌株可用于多糖疫苗、蛋白结合疫苗的血清型特异性抗原性检测，通过 ELISA 法评估疫苗诱导机体产生针对特定血清型抗体的水平，验证疫苗的血清型覆盖效力；同时可作为疫苗生产过程中的质量控制菌株，检测疫苗的纯度、稳定性及安全性。在诊断试剂领域，可用于肺炎链球菌血清型检测试剂盒、核酸检测试剂盒的研发与性能验证，评估试剂的灵敏度、特异性与批间一致性，确保临床可通过该试剂快速、准确鉴定肺炎链球菌血清型，为针对性治疗与疫苗选择提供依据。
临床检测与抗菌药物研究
在临床微生物实验室，该菌株可用于技术人员的专业技能培训，帮助人员熟练掌握肺炎链球菌的分离、纯化、血清型鉴定流程（如荚膜肿胀试验、血清凝集试验），提升临床样本（如痰液、脑脊液、血液）中肺炎链球菌的检出准确率与血清型鉴定效率。同时，该菌株可作为抗菌药物敏感性试验的标准参照菌株，采用肉汤稀释法或纸片扩散法，检测青霉素、头孢曲松、左氧氟沙星、阿奇霉素等临床常用抗菌药物对肺炎链球菌的最小抑菌浓度（MIC），为临床医生根据药敏结果制定个性化抗感染治疗方案提供参考，避免因盲目用药导致耐药菌株产生与扩散。
五、安全注意事项
该菌株为人类致病性微生物，可通过呼吸道飞沫传播、接触污染样本（如菌液、培养基）等途径感染，引发肺炎、脑膜炎、败血症等严重疾�。僮魇毙柩细褡袷厣锇踩叮˙SL-2）实验室操作规程。操作人员需佩戴无菌乳胶手套、医用外科口罩（或 N95 口罩）、护目镜，若进行菌液振荡、离心等易产生气溶胶的操作，需穿戴一次性防护服；所有接种、菌液转移、染色、离心等操作必须在生物安全柜内完成，生物安全柜需定期（每 6 个月）进行性能检测，确保其正常运行。
实验废弃物需分类严格处理：使用过的菌液、培养基、接种环、离心管等，需装入专用耐高温生物安全垃圾袋，密封后经 121℃、30 分钟高压蒸汽灭菌处理，灭菌后再按普通废弃物丢弃；一次性防护用品（如手套、口罩、防护服）需单独收集，经灭菌后按医疗废弃物规范处置；染色后的玻片需浸泡在 0.5% 次氯酸钠溶液中消毒 30 分钟，再用清水冲洗干净后烘干备用。实验台面、生物安全柜内壁、培养箱、离心机等仪器设备，使用后需用 0.5% 次氯酸钠溶液或 0.3% 过氧乙酸溶液擦拭消毒，作用 30 分钟后用无菌水擦拭干净；实验室每周需进行一次全面环境消毒，可采用紫外线照射（照射时间≥60 分钟，照射时确保无人员在�。┗蚬趸庋舴ǎ痹谏锇踩�。
菌株需由专人负责管理，建立 “双人双锁” 储存制度，储存位置需明确标识并远离火源、水源。领用菌株时需填写《ATCC49619 肺炎链球菌领用登记表》，详细记录领用人员、领用时间、领用数量、使用用途、使用地点及归还时间；严禁将菌株转让给未具备 BSL-2 实验室资质的单位或个人，不得擅自扩大培养菌株或用于非科研、检测目的的实验。若发生菌株泄漏（如菌液泼洒、培养皿破碎），需立即关闭生物安全柜，撤离实验室人员，隔离污染区域，用浸有 0.5% 次氯酸钠溶液的纱布覆盖污染表面，作用 30 分钟后由专业人员穿戴防护装备清理；若人员意外接触菌株（如皮肤破损处接触菌液、吸入含菌气溶胶），需立即用生理盐水冲洗接触部位（皮肤接触冲洗≥15 分钟，黏膜接触冲洗≥20 分钟），皮肤接触者需涂抹碘伏消毒，黏膜接触或吸入者需立即前往医院就医，并上报实验室负责人与当地疾控部门，按要求开展追踪观察与预防性治疗（如使用青霉素类抗生素）。
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