ATCC19615 化脓性链球菌（Streptococcus pyogenes）产品说明
一、菌株基础信息
本品对应菌株为 ATCC19615 化脓性链球菌，隶属于链球菌科链球菌属，是经 ATCC（美国典型培养物保藏中心）通过基因测序、生化特征验证、血清型（M 型）鉴定及毒力因子检测等多维度标准化流程严格鉴定，并采用专业低温保藏技术留存的标准菌株。该菌株遗传背景清晰可追溯，经长期传代监测显示遗传特性稳定无变异，生物学特征具有高度可重复性，作为人类重要致病性链球菌（A 群链球菌）的经典代表株，是微生物领域化脓性链球菌致病机制研究、血清型流行趋势分析、临床诊断技术开发及抗菌药物敏感性试验的核心参照菌株。其专属菌株编号具备全球唯一性，可实现从菌株获取、实验操作到结果分析的全流程溯源，有效保障不同实验室、不同批次实验数据的精准比对，为化脓性链球菌相关科研项目的严谨性与临床检测工作的可靠性提供关键技术支撑。
二、生物学特性
形态特征
该菌株为革兰氏阳性球菌，显微镜下呈圆形或椭圆形，以长链状排列为典型形态（链长差异显著，短链由 3-5 个细胞组成，长链可包含 15-30 个细胞），偶见成对排列。菌株无芽孢生成，不具备鞭毛结构，无法自主运动，多数菌株表面包裹薄荚膜（需通过荚膜染色法清晰观察），细胞壁表面富含 M 蛋白（核心毒力因子，可介导菌株黏附与抗吞噬）。在含 5% 绵羊血的血琼脂平板上培养后，形成的菌落呈灰白色、半透明状，质地较致密且表面光滑有光泽，菌落边缘整齐无锯齿，直径约 0.4-0.9mm，所有菌株均表现为强烈的 β- 溶血特性，即菌落周围形成宽大、透明的溶血环（宽度可达 2-5mm），这一显著溶血特征是区分该菌株与肺炎链球菌（α- 溶血）、口腔链球菌（α 或 γ- 溶血）等其他链球菌的核心形态依据。
生理生化特性
该菌株为兼性厌氧微生物，最适生长温度与人体正常体温一致，处于 35-37℃区间，最适 pH 值为 7.1-7.5，生长过程对营养要求苛刻，需在含血液、血清或酵母提取物的培养基中才能良好生长，普通营养琼脂培养基中生长缓慢且菌落细小、溶血不明显。糖类发酵方面，可高效发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖，发酵过程仅产生酸性物质（主要为乳酸），不产生气体；对甘露醇、山梨醇、菊糖、木糖无发酵能力，不能分解七叶苷。生化反应试验中，触酶试验、氧化酶试验、精氨酸双水解酶试验及 VP 试验结果均为阴性；能稳定合成并分泌多种毒力因子，包括链球菌溶血素 O（对氧敏感）、链球菌溶血素 S（对氧稳定）、致热外毒素（可引发猩红热皮疹）、链激酶（溶解纤维蛋白）、链道酶（分解 DNA）及透明质酸酶（促进菌株扩散）；对杆菌肽（Bacitracin）高度敏感，在含 0.04U 杆菌肽的纸片周围可形成直径≥10mm 的明显抑菌圈，这一特性是鉴别该菌株（A 群链球菌）与 B、C、G 群链球菌的关键指标。
三、培养与保存条件
培养条件
推荐使用含 5% 绵羊血或兔血的血琼脂培养基进行培养，该培养基可满足菌株生长所需的优质营养物质，同时能充分展现其 β- 溶血特性。接种时采用分区划线接种法，确保菌落分离均匀，便于单菌落挑�。又趾蠼嘌糜� 35-37℃、含 5% CO?的恒温培养箱内培养 16-22 小时，CO?环境可促进菌株生长速率与溶血环清晰度，避免因氧气浓度过高导致链球菌溶血素 O 活性降低、溶血环变浅。若需扩大培养，可选用添加 1.2% 酵母提取物的脑心浸液肉汤（BHI 肉汤），在与固体培养相同的温度和气体环境下，采用低速振荡培养（110-140rpm），培养 14-18 小时后，菌液浓度可达到 10?-10?CFU/mL，且能最大程度保留菌株的毒力因子表达能力（如 M 蛋白、溶血素）。培养过程中需严格控制温度波动范围（不超过 ±1℃），同时限制传代次数（建议不超过 3 代），防止菌株因频繁传代导致毒力减弱、溶血特性降低或生化反应异常。
保存条件
短期保存（1-2 周）时，需选取培养至对数生长期（培养 12-14 小时）的菌株，接种至血琼脂斜面培养基，置于 35-37℃、5% CO?培养箱中培养 10-12 小时，待菌落均匀形成后，立即转移至 4℃冰箱冷藏保存，冷藏期间每 2 天观察一次菌株状态，若发现菌落出现污染、溶血环褪色或菌体自溶迹象，需及时重新接种培养。长期保存建议采用冷冻干燥保存法，取对数生长期菌液，与含 10% 脱脂乳 + 0.6% 酵母提取物的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀（保护剂可增强菌株抗冻性，减少冷冻损伤），分装至无菌冷冻管（每管 0.8-1mL），经梯度降温处理（-20℃预冻 4 小时，再转入 - 80℃冷冻 7 小时）后进行冷冻干燥。干燥完成后，将冷冻管置于 - 80℃冰箱或液氮（-196℃）中保存，保存期限可达 4-6 年。长期保存期间，建议每 10 个月复苏一次菌株，复苏后通过形态观察（重点检查链状排列与 β- 溶血特性）、杆菌肽敏感性试验、M 蛋白检测及毒力因子活性测定，全面验证菌株纯度与生理活性，确保后续使用时菌株性能稳定。
四、应用领域
致病机制与毒力因子研究
作为 A 群链球菌的标准菌株，ATCC19615 是研究化脓性链球菌致病机制的核心材料。可用于解析 M 蛋白的分子结构与抗吞噬机制（如与宿主补体成分结合抑制吞噬）、毒力因子（如链球菌溶血素 O/S、致热外毒素）的表达调控网络，以及菌株在皮肤（如脓疱疮）、呼吸道黏膜（如咽峡炎）的定植、黏附与侵袭过程；同时可用于探究宿主免疫系统（如中性粒细胞吞噬作用、T 淋巴细胞免疫应答、补体系统激活）对菌株的识别与清除机制，为猩红热、丹毒、风湿热、急性肾小球肾炎等化脓性链球菌感染性疾病的防控策略（如新型疫苗靶点筛选、毒力抑制剂研发）研究提供基础数据支持。
诊断试剂研发与质量控制
在化脓性链球菌诊断试剂领域，该菌株可用于核酸检测试剂盒（如实时荧光 PCR 检测 M 蛋白基因、致热外毒素基因）、抗原检测试剂盒（如免疫层析法检测 A 群链球菌特异性抗原）的研发与性能验证，评估试剂的灵敏度（最低检测限）、特异性（无交叉反应）、批间一致性，确保临床可通过该试剂快速、准确诊断化脓性链球菌感染，避免误诊或漏诊。同时，可作为临床微生物实验室常规检测方法（如杆菌肽试验、溶血试验、血清学分群试验）的质量控制菌株，定期验证检测方法的准确性与可靠性，保障临床检测结果的可信度。
临床抗菌药物研究与技能培训
在临床抗菌药物研究领域，该菌株可作为抗菌药物敏感性试验的标准参照菌株，采用肉汤稀释法或纸片扩散法，检测青霉素、阿莫西林、头孢噻肟、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星等临床常用抗菌药物对化脓性链球菌的最小抑菌浓度（MIC），建立抗菌药物敏感性判断标准，为临床医生根据药敏结果制定个性化抗感染治疗方案提供参考，尤其可用于监测红霉素、克林霉素等药物的耐药趋势，避免因盲目用药导致耐药菌株产生与扩散。在临床微生物实验室，该菌株可用于技术人员的专业技能培训，帮助人员熟练掌握化脓性链球菌的分离（如咽拭子标本处理）、纯化、鉴定流程（如杆菌肽试验、乳胶凝集法分群），提升临床样本（如咽拭子、皮肤脓液、血液、脑脊液）中化脓性链球菌的检出准确率与鉴定效率。
五、安全注意事项
该菌株为人类强致病性微生物（A 群链球菌），可通过呼吸道飞沫传播、皮肤黏膜直接接触、伤口感染等途径传播，引发猩红热、风湿热、急性肾小球肾炎等严重疾�。踔恋贾掳苎�、中毒性休克综合征，操作时需严格遵守生物安全二级（BSL-2）实验室操作规程，高浓度菌液操作（如菌液离心、超声破碎）或产生气溶胶的实验需在生物安全二级加强型（BSL-2+）实验室进行。操作人员需佩戴无菌乳胶手套、N95 防护口罩、护目镜，穿戴一次性防护服与防滑鞋套；所有接种、菌液转移、离心、染色等操作必须在生物安全柜内完成，生物安全柜需定期（每 6 个月）进行风速、气密性、HEPA 过滤器效率检测，确保其正常运行。
实验废弃物需分类严格处理：使用过的菌液、培养基、接种环、离心管等，需装入专用耐高温生物安全垃圾袋，密封后经 121℃、30 分钟高压蒸汽灭菌处理（含高浓度菌液或毒力因子提取物的废弃物，需延长灭菌时间至 45 分钟），灭菌后再按普通废弃物丢弃；一次性防护用品（如手套、口罩、防护服）需单独收集，经灭菌后按医疗废弃物规范处置；染色后的玻片需浸泡在 0.5% 次氯酸钠溶液中消毒 40 分钟，再用清水冲洗干净后烘干备用。实验台面、生物安全柜内壁、培养箱、离心机等仪器设备，使用后需用 0.5% 次氯酸钠溶液或 0.4% 过氧乙酸溶液擦拭消毒，作用 30 分钟后用无菌水擦拭干净；实验室每周需进行一次全面环境消毒，可采用紫外线照射（照射时间≥70 分钟，照射时确保无人员在�。┗蚬趸庋舴ǎ痹谏锇踩�。
菌株需由专人负责管理，建立 “双人双锁” 储存制度，储存位置需明确标识 “强致病性微生物（A 群链球菌）”，并远离火源、水源、腐蚀性试剂与食品。领用菌株时需填写《ATCC19615 化脓性链球菌领用登记表》，详细记录领用人员（需具备 BSL-2 实验室操作资质）、领用时间、领用数量、使用用途、使用地点及归还时间；严禁将菌株转让给未具备相应资质的单位或个人，不得擅自扩大培养菌株或用于非科研、检测目的的实验。若发生菌株泄漏（如菌液泼洒、培养皿破碎），需立即关闭生物安全柜，撤离实验室所有人员，封锁污染区域，由专业人员穿戴正压防护服进入污染区域，用浸有 0.5% 次氯酸钠溶液的纱布覆盖污染表面，作用 30 分钟后清理，清理后对污染区域再次消毒并检测环境微生物；若人员意外接触菌株（如皮肤破损处接触菌液、吸入含菌气溶胶），需立即用生理盐水冲洗接触部位（皮肤接触冲洗≥20 分钟，黏膜接触冲洗≥30 分钟），皮肤接触者需涂抹碘伏消毒，立即前往医院就医并告知医生菌株接触史，同时上报实验室负责人与当地疾控部门，按要求开展追踪观察与预防性治疗（如使用青霉素类抗生素）。
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