ATCC12386 无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）产品说明
一、菌株基础信息
本品对应菌株为 ATCC12386 无乳链球菌，隶属于链球菌科链球菌属，是经 ATCC（美国典型培养物保藏中心）通过基因测序、血清群鉴定（B 群链球菌）、生化特征验证及毒力因子检测等多维度标准化流程严格鉴定，并采用专业低温保藏技术留存的标准菌株。该菌株遗传背景清晰可追溯，经长期传代监测显示遗传特性稳定无变异，生物学特征具有高度可重复性，作为人类重要条件致病性链球菌（B 群链球菌，GBS）的典型代表株，是微生物领域无乳链球菌致病机制研究、母婴感染防控分析、临床诊断技术开发及抗菌药物敏感性试验的核心参照菌株。其专属菌株编号具备全球唯一性，可实现从菌株获取、实验操作到结果分析的全流程溯源，有效保障不同实验室、不同批次实验数据的精准比对，为无乳链球菌相关科研项目的严谨性与临床检测工作的可靠性提供关键技术支撑。
二、生物学特性
形态特征
该菌株为革兰氏阳性球菌，显微镜下呈圆形或椭圆形，以短链状排列为典型形态（链长较均匀，多由 3-8 个细胞组成，偶见 10 个以上细胞的长链），部分情况下可见成对排列。菌株无芽孢生成，不具备鞭毛结构，无法自主运动，多数菌株表面可形成明显荚膜（通过墨汁负染法可清晰观察到透明晕环），荚膜为主要毒力因子之一，可介导抗吞噬作用。在含 5% 绵羊血的血琼脂平板上培养后，形成的菌落呈灰白色、半透明状，质地柔软且表面光滑有光泽，菌落边缘整齐无锯齿，直径约 0.5-1.2mm，所有菌株均表现为典型 β- 溶血特性（少数菌株为 α 或 γ- 溶血），即菌落周围形成宽大、透明的溶血环（宽度可达 2-3mm），这一形态特征是区分该菌株与血链球菌（α- 溶血）、肺炎链球菌（α- 溶血）的核心依据。
生理生化特性
该菌株为兼性厌氧微生物，最适生长温度与人体正常体温一致，处于 35-37℃区间，最适 pH 值为 7.2-7.6，生长过程对营养要求中等，在含血液、血清或酵母提取物的培养基中生长良好，普通营养琼脂培养基中可缓慢生长但菌落较小。糖类发酵方面，可高效发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、海藻糖，发酵过程仅产生酸性物质（主要为乳酸），不产生气体；对甘露醇、山梨醇、菊糖、木糖无发酵能力，不能分解七叶苷。生化反应试验中，触酶试验、氧化酶试验结果均为阴性，精氨酸双水解酶试验呈阳性，VP 试验呈弱阳性；能合成并分泌多种毒力因子，包括荚膜多糖（抗吞噬）、β- 溶血素（损伤宿主细胞）、CAMP 因子（增强金黄色葡萄球菌溶血活性）、黏附素（介导黏膜定植）；对杆菌肽（Bacitracin）耐药，CAMP 试验阳性，这一特性是鉴别该菌株（B 群链球菌）与化脓性链球菌（A 群，杆菌肽敏感、CAMP 阴性）的关键指标。
三、培养与保存条件
培养条件
推荐使用含 5% 绵羊血的血琼脂培养基或 GBS 专用选择性培养基（如含萘啶酸和多粘菌素 B 的培养基）进行培养，专用选择性培养基可抑制杂菌生长，便于从临床样本中分离纯化菌株。接种时采用分区划线接种法，确保菌落分离均匀，接种后将培养基置于 35-37℃、含 5% CO?的恒温培养箱内培养 18-24 小时，CO?环境可促进菌株荚膜合成与溶血环清晰度，避免因氧气浓度过高导致溶血活性减弱。若需扩大培养，可选用添加 1.0% 酵母提取物的脑心浸液肉汤（BHI 肉汤），在与固体培养相同的温度和气体环境下，采用低速振荡培养（120-150rpm），培养 16-20 小时后，菌液浓度可达到 10?-10?CFU/mL，且能最大程度保留菌株的毒力因子表达能力（如荚膜多糖、CAMP 因子）。培养过程中需严格控制温度波动范围（不超过 ±1℃），同时限制传代次数（建议不超过 4 代），防止菌株因频繁传代导致荚膜丢失、毒力减弱或生化特性改变。
保存条件
短期保存（1-2 周）时，需选取培养至对数生长期（培养 14-16 小时）的菌株，接种至血琼脂斜面培养基，置于 35-37℃、5% CO?培养箱中培养 12-14 小时，待菌落均匀形成后，立即转移至 4℃冰箱冷藏保存，冷藏期间每 2-3 天观察一次菌株状态，若发现菌落出现污染、溶血环变浅或菌体自溶迹象，需及时重新接种培养。长期保存建议采用冷冻干燥保存法，取对数生长期菌液，与含 10% 脱脂乳 + 0.6% 酵母提取物的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀（保护剂可增强菌株抗冻性，减少冷冻损伤），分装至无菌冷冻管（每管 0.8-1mL），经梯度降温处理（-20℃预冻 4 小时，再转入 - 80℃冷冻 7 小时）后进行冷冻干燥。干燥完成后，将冷冻管置于 - 80℃冰箱或液氮（-196℃）中保存，保存期限可达 4-6 年。长期保存期间，建议每 10-12 个月复苏一次菌株，复苏后通过形态观察（重点检查荚膜与 β- 溶血特性）、CAMP 试验、血清群鉴定（如乳胶凝集试验），全面验证菌株纯度与生理活性，确�：笮褂檬本晷阅芪榷�。
四、应用领域
致病机制与母婴感染研究
作为 B 群链球菌的标准菌株，ATCC12386 是研究无乳链球菌致病机制的核心材料。可用于解析荚膜多糖的抗吞噬机制、毒力因子（如 β- 溶血素、CAMP 因子、黏附素）的表达调控规律，以及菌株在孕妇生殖道、新生儿呼吸道的定植、侵袭过程；同时可用于探究母婴感染（如新生儿败血症、脑膜炎、肺炎，孕妇产褥期感染）的发病机制，分析宿主（孕妇、新生儿）免疫系统对菌株的应答特点，为母婴感染防控策略（如产前筛查、预防性用药）研究提供基础数据支持。
诊断试剂研发与质量控制
在无乳链球菌诊断试剂领域，该菌株可用于核酸检测试剂盒（如 PCR 检测荚膜多糖基因、CAMP 因子基因）、抗原检测试剂盒（如免疫层析法检测 GBS 抗原）、血清学检测试剂（如抗体检测 ELISA 试剂盒）的研发与性能验证，评估试剂的灵敏度（最低检测限）、特异性（无交叉反应）、批间一致性，确保临床可通过该试剂快速、准确诊断无乳链球菌感染，尤其满足孕妇产前筛查与新生儿早期诊断的需求。同时，可作为临床微生物实验室 GBS 检测方法（如选择性培养、CAMP 试验、血清凝集试验）的质量控制菌株，定期验证检测方法的准确性与可靠性，保障临床检测结果的可信度。
临床抗菌药物研究与技能培训
在临床抗菌药物研究领域，该菌株可作为抗菌药物敏感性试验的标准参照菌株，采用肉汤稀释法或纸片扩散法，检测青霉素、氨苄西林、头孢曲松、红霉素、克林霉素、万古霉素等临床常用抗菌药物对无乳链球菌的最小抑菌浓度（MIC），建立抗菌药物敏感性判断标准，为临床医生根据药敏结果制定个性化治疗方案提供参考，尤其指导孕妇产前预防性用药与新生儿感染治疗，避免因红霉素、克林霉素耐药导致治疗失败。在临床微生物实验室，该菌株可用于技术人员的专业技能培训，帮助人员熟练掌握 GBS 的分离（如生殖道拭子、新生儿血液标本处理）、纯化、鉴定流程（如 CAMP 试验、选择性培养验证），提升临床样本中无乳链球菌的检出准确率与鉴定效率。
五、安全注意事项
该菌株为人类条件致病性微生物（B 群链球菌），主要�：υ懈居胄律梢⑿律苎�、脑膜炎等严重疾�。僮魇毙枳袷厣锇踩叮˙SL-2）实验室操作规程，高浓度菌液操作（如菌液离心、毒力因子提�。┗虿芙旱氖笛樾杓忧糠阑�。操作人员需佩戴无菌乳胶手套、医用外科口罩（或 N95 口罩）、护目镜，在生物安全柜内完成接种、菌液转移、染色等操作，防止菌株泄漏造成环境污染或意外感染。
实验废弃物需分类严格处理：使用过的菌液、培养基、接种环、离心管等，需装入专用耐高温生物安全垃圾袋，密封后经 121℃、30 分钟高压蒸汽灭菌处理（含高浓度菌液的废弃物需延长灭菌时间至 45 分钟），灭菌后再按普通废弃物丢弃；一次性防护用品（如手套、口罩）需单独收集，灭菌后按医疗废弃物规范处置；染色后的玻片需浸泡在 0.5% 次氯酸钠溶液中消毒 30 分钟，再用清水冲洗干净后烘干备用。实验台面、生物安全柜内壁、培养箱、离心机等仪器设备，使用后需用 0.5% 次氯酸钠溶液或 0.3% 过氧乙酸溶液擦拭消毒，作用 30 分钟后用无菌水擦拭干净；实验室每周需进行一次全面环境消毒，可采用紫外线照射（照射时间≥60 分钟，照射时确保无人员在�。┗蚬趸庋舴ǎ痹谏锇踩�。
菌株需由专人负责管理，建立领用登记制度，详细记录领用人员（需具备 BSL-2 实验室操作资质）、领用时间、领用数量、使用用途、使用地点及归还时间。严禁将菌株随意转让给未具备相应资质的单位或个人，不得擅自扩大培养菌株或用于非科研、检测目的的实验。若发生菌株泄漏（如菌液泼洒、培养皿破碎），需立即关闭生物安全柜，撤离实验室人员，隔离污染区域，用浸有 0.5% 次氯酸钠溶液的纱布覆盖污染表面，作用 30 分钟后清理，清理后对污染区域再次消毒；若人员意外接触菌株（如皮肤黏膜接触、吸入气溶胶），需立即用生理盐水冲洗接触部位（皮肤接触冲洗≥15 分钟，黏膜接触冲洗≥20 分钟），皮肤接触者需涂抹碘伏消毒，必要时就医检查，并上报实验室负责人与相关监管部门。
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