NCTC6017 伞形沙门氏菌（Salmonella abony WDCM 00029）产品说明
一、菌株基础信息
本品对应菌株为 NCTC6017 伞形沙门氏菌（Salmonella abony），隶属于肠杆菌科沙门氏菌属，是经 NCTC（英国国家典型培养物保藏中心）、WDCM（世界微生物数据中心，编号 00029）通过基因测序（16S rRNA 及 invA 基因鉴定）、血清型鉴定（O4，H:i:1,2）、生化特征验证及致病性检测等多维度标准化流程严格鉴定，并采用专业低温保藏技术留存的标准菌株。该菌株遗传背景清晰可追溯，经长期传代监测显示遗传特性稳定无变异，生物学特征（尤其是血清型与致病性相关表型）具有高度可重复性，作为人类肠道致病性沙门氏菌的典型代表株，是微生物领域沙门氏菌致病机制研究、食源性感染防控分析、临床诊断技术开发及抗菌药物敏感性试验的核心参照菌株。其专属保藏编号具备全球唯一性，可实现从菌株获取、实验操作到结果分析的全流程溯源，有效保障不同实验室、不同批次实验数据的精准比对，为伞形沙门氏菌相关科研项目的严谨性与食源性疾病防控工作的可靠性提供关键技术支撑。
二、生物学特性
形态特征
该菌株为革兰氏阴性短杆菌，显微镜下呈直杆状，两端钝圆，大小均匀，长约 1.0-2.0μm，宽约 0.5-0.8μm，无芽孢生成，不具备荚膜结构，多数菌株具有周生鞭毛（H 抗原），可自主运动（少数培养条件下鞭毛表达减弱，运动性降低）。在普通营养琼脂培养基上培养后，形成的菌落呈乳白色、半透明状，质地湿润且表面光滑，边缘整齐无锯齿，直径约 1.0-2.0mm，菌落形态均一，无色素产生；在 SS 选择性培养基（Salmonella-Shigella Agar）上，因能分解乳糖（部分菌株迟缓分解），菌落呈淡红色或无色，周围培养基可能出现轻微变色；在麦康凯培养基上，菌落呈无色透明状，与大肠杆菌（红色菌落）形成明显区分，这一选择性培养基上的菌落特征是该菌株初步分离鉴定的核心依据。
生理生化特性
该菌株为兼性厌氧微生物，最适生长温度与人体体温一致，处于 35-37℃区间，最适 pH 值为 6.8-7.4，生长过程对营养要求不高，在普通营养琼脂、LB 培养基、TSB 培养基中均可良好生长，在选择性培养基（如 SS、麦康凯）中能抑制杂菌生长并形成特征性菌落。生化反应试验中，氧化酶试验阴性（典型肠杆菌科特征），触酶试验阳性（能分解过氧化氢），硝酸盐还原试验阳性（能将硝酸盐还原为亚硝酸盐），吲哚试验阴性（不产生吲哚），甲基红试验阳性（发酵葡萄糖产酸），VP 试验阴性（不产生乙酰甲基甲醇），柠檬酸盐利用试验阳性（能以柠檬酸盐为唯一碳源），尿素酶试验阴性（不分解尿素），赖氨酸脱羧酶试验阳性（分解赖氨酸产生胺类物质）；糖类发酵方面，可发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇，发酵过程产酸产气；不发酵乳糖（或迟缓发酵）、蔗糖、阿拉伯糖，这一生化反应模式是区分沙门氏菌与其他肠道杆菌（如大肠杆菌、克雷伯菌）的关键指标。此外，该菌株携带沙门氏菌致病性相关基因（如 invA、hilA），具有侵袭肠道上皮细胞的能力，可引发肠道感染症状。
三、培养与保存条件
培养条件
推荐使用营养琼脂培养基或 LB 培养基进行常规培养，用于分离纯化时可选用 SS 选择性培养基或麦康凯培养基。接种时采用划线接种法（分离单菌落）或涂布接种法（扩增菌体量），接种后将培养基置于 35-37℃恒温培养箱内静置培养 18-24 小时，兼性厌氧环境可满足菌株生长需求，无需额外控制 CO?浓度。若需液体扩大培养（用于菌体量扩增或生化试验），可选用 TSB 液体培养基（Tryptic Soy Broth），接种量为 1%-2%（体积比），置于 35-37℃、150-180rpm 的摇床中振荡培养 16-20 小时，培养后期菌液呈均匀浑浊状，菌浓度可达 10?-10??CFU/mL，且能最大程度保留菌株的致病性相关表型（如鞭毛表达、侵袭能力）。培养过程中需严格控制温度波动范围（不超过 ±1℃），避免传代次数过多（建议不超过 5 代），防止菌株鞭毛丢失或致病性减弱。
保存条件
短期保存（1-2 周）时，可采用斜面培养基保存法：选取培养 18-24 小时的菌株，接种至营养琼脂斜面培养基，置于 35-37℃培养箱中培养 12-14 小时，待菌落均匀形成后，立即转移至 4℃冰箱冷藏保存，冷藏期间每 3-4 天观察一次菌株状态，若发现菌落污染、干燥或菌体自溶，需及时重新接种。长期保存建议采用冷冻干燥保存法或甘油冷冻保存法：
冷冻干燥保存法：取对数生长期菌液，与含 10% 脱脂乳的保护剂按 1:1 体积比充分混匀，分装至无菌冷冻管（每管 0.5-1mL），经梯度降温（-20℃预冻 3 小时，-80℃冷冻 6 小时）后进行冷冻干燥，干燥完成后置于 - 80℃冰箱保存，保存期限可达 5-8 年；
甘油冷冻保存法：将对数生长期菌液与无菌甘油（终浓度 20%）混合均匀，分装至无菌冷冻管，直接置于 - 80℃冰箱保存，保存期限可达 3-5 年，该方法操作简便，适合实验室常规长期保存。
长期保存期间，建议每 12 个月复苏一次菌株，复苏后通过形态观察（革兰氏染色、鞭毛染色）、生化反应验证（如 API 20E 生化鉴定条）、血清型鉴定（玻片凝集试验），全面验证菌株纯度与生理活性，确�：笮褂檬本晷阅芪榷�。
四、应用领域
致病机制与食源性感染研究
作为肠道致病性沙门氏菌的标准菌株，NCTC6017 是研究伞形沙门氏菌致病机制的核心材料。可用于解析菌株侵袭基因（如 invA、prgH）的表达调控规律、鞭毛（H 抗原）介导的运动与定植机制，以及菌株在肠道上皮细胞的侵袭、胞内增殖过程；同时可用于探究沙门氏菌食源性传播途径（如食品污染、水源污染）、宿主免疫系统（如肠道黏膜免疫、巨噬细胞吞噬）对菌株的应答特点，为食源性沙门氏菌感染（如急性胃肠炎）的防控策略（如食品加工环节消毒、疫苗研发）研究提供基础数据支持。
诊断试剂研发与质量控制
在沙门氏菌诊断试剂领域，该菌株可用于核酸检测试剂盒（如 PCR 检测 invA、hilA 等特异性基因）、抗原检测试剂盒（如免疫层析法检测 O 抗原或 H 抗原）、血清学检测试剂（如肥达反应诊断血清）的研发与性能验证，评估试剂的灵敏度（最低检测限）、特异性（无交叉反应）、批间一致性，确保临床实验室与食品检测机构可通过该试剂快速、准确诊断伞形沙门氏菌感染或污染，满足食源性疾病早期诊断与食品安全快速筛查的需求。同时，可作为微生物检测实验室沙门氏菌检测方法（如选择性培养、生化鉴定、血清凝集）的质量控制菌株，定期验证检测方法的准确性与可靠性，保障检测结果的可信度，避免因检测误差导致的感染漏诊或食品污染误判。
抗菌药物研究与技能培训
在抗菌药物研究领域，该菌株可作为抗菌药物敏感性试验的标准参照菌株，采用肉汤稀释法或纸片扩散法（Kirby-Bauer 法），检测氟喹诺酮类（如环丙沙星）、头孢菌素类（如头孢曲松）、氨基糖苷类（如庆大霉素）、磺胺类（如复方磺胺甲噁唑）等临床常用抗菌药物对伞形沙门氏菌的最小抑菌浓度（MIC），建立抗菌药物敏感性判断标准，为临床医生根据药敏结果制定个性化治疗方案提供参考，避免因盲目用药导致耐药菌株产生与扩散（如沙门氏菌对氟喹诺酮类药物的耐药性问题）。在临床与食品微生物实验室，该菌株可用于技术人员的专业技能培训，帮助人员熟练掌握沙门氏菌的分离（如食品样本前处理、粪便样本增菌培养）、纯化、鉴定流程（如生化反应组合验证、血清型鉴定），提升临床样本与食品样本中伞形沙门氏菌的检出准确率与鉴定效率。
五、安全注意事项
该菌株为人类致病性微生物（食源性致病菌），可通过食用被污染的食品或水源感染，引发急性胃肠炎、发热、腹痛、腹泻等症状，免疫力低下人群可能引发败血症等严重并发症，操作时需严格遵守生物安全二级（BSL-2）实验室操作规程，处理高浓度菌液（如菌液离心、毒力因子提�。┗蛭廴狙荆ㄈ缡称吩冉�、粪便样本）时需加强防护。操作人员需佩戴无菌乳胶手套、医用外科口罩（或 N95 口罩）、护目镜，在生物安全柜内完成接种、菌液转移、样本处理等操作，防止菌株泄漏造成环境（如食品加工区、实验室）污染或人员感染。
实验废弃物需分类严格处理：使用过的菌液、培养基、接种环、离心管等，需装入专用耐高温生物安全垃圾袋，密封后经 121℃、30 分钟高压蒸汽灭菌处理（含高浓度菌液或污染样本的废弃物需延长灭菌时间至 45 分钟），灭菌后再按普通废弃物丢弃；一次性防护用品（如手套、口罩）需单独收集，灭菌后按医疗废弃物规范处置；污染的实验台面、生物安全柜内壁、培养箱等仪器设备，使用后需用含 0.5% 次氯酸钠溶液或 0.3% 过氧乙酸溶液擦拭消毒，作用 30 分钟后用无菌水擦拭干净；实验室每周需进行一次全面环境消毒，可采用紫外线照射（照射时间≥60 分钟，照射时确保无人员在�。┗蚬趸庋舴ǎ痹谏锇踩�。
菌株需由专人负责管理，建立 “双人双锁” 储存制度，储存位置需明确标识 “食源性致病菌”，并远离食品、水源及生活用品。领用菌株时需填写《NCTC6017 伞形沙门氏菌领用登记表》，详细记录领用人员（需具备 BSL-2 实验室操作资质）、领用时间、领用数量、使用用途（科研、检测或培训）、使用地点及归还时间；严禁将菌株随意转让给未具备相应资质的单位或个人，不得擅自扩大培养菌株或用于非科研、检测目的的实验，尤其禁止将实验室菌株用于食品污染模拟实验后未经灭菌直接排放。若发生菌株泄漏（如菌液泼洒、培养皿破碎），需立即关闭生物安全柜，撤离实验室人员，隔离污染区域，用浸有 0.5% 次氯酸钠溶液的纱布覆盖污染表面，作用 30 分钟后清理，清理后对污染区域再次消毒并检测环境微生物；若人员意外接触菌株（如皮肤黏膜接触、吸入气溶胶），需立即用生理盐水冲洗接触部位（皮肤接触冲洗≥15 分钟，黏膜接触冲洗≥20 分钟），皮肤接触者需涂抹碘伏消毒，必要时就医检查，并上报实验室负责人与当地疾控部门（涉及食品污染需同步上报市场监管部门）。
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