形态与生化:菌体呈球形或椭圆形,直径 0.5-0.8μm,常成对或短链状排列(链长较粪肠球菌短),无芽孢,多数菌株无鞭毛(无运动性)。最适生长温度 35-37℃,适宜 pH 6.0-8.0,兼性厌氧(有氧环境生长略优于无氧);可发酵葡萄糖、乳糖产酸(不产气),不发酵甘露醇、山梨醇(与粪肠球菌关键差异),触酶阴性,氧化酶阴性;耐逆性强,可在含 6.5% 氯化钠、40% 胆汁盐的培养基中生长,能水解七叶苷,这些生化特征是其与粪肠球菌精准鉴别的核心依据。
致病性相关:属于条件致病菌,自然定植于人类肠道,也是临床医院感染的常见病原体之一,免疫功能低下人群(如老年患者、肿瘤患者)易感染,可引发尿路感染、败血症、腹腔感染等;ATCC 35667 毒力中等,无显著耐药基因,主要用于与临床耐药屎肠球菌(如万古霉素耐药屎肠球菌 VRE)的对比研究,及肠球菌致病性机制探索的模式株。
培养:无需特殊气体环境,常规有氧培养即可。推荐培养基包括脑心浸液琼脂(BHI,用于菌株活化与纯培养)、麦康凯琼脂(MAC,因发酵乳糖,菌落呈淡粉红色,直径 0.8-1.2mm)、肠球菌选择性培养基(如叠氮钠血琼脂)。37℃培养 24-36 小时后,BHI 琼脂上菌落呈乳白色、表面光滑、边缘整齐,质地较致密;血琼脂平板上多形成 α- 溶血环(草绿色溶血区),少数为 γ- 溶血(无溶血),与粪肠球菌常见的 β- 溶血有明显区别。
保存:短期保存(1-4 周):将活化后的纯菌株接种至 BHI 琼脂斜面,37℃培养 18-24 小时后,密封斜面管口,置于 4℃冰箱冷藏,期间每 2 周观察 1 次,防止杂菌污染或菌株失活;长期保存(1 年以上):采用 - 80℃甘油冷冻保存(20% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合,分装冻存管),或冻干保存(以 10% 脱脂乳为保护剂,冻干后置于 - 20℃以下环境)。复苏时,将冻存菌液或冻干菌粉接入 BHI 肉汤,37℃振荡培养 12-16 小时(转速 180rpm),待菌液浑浊后转接固体培养基纯化,确保菌株纯度与活性符合实验要求。
应用:在临床检测领域,作为屎肠球菌分离鉴定的质控菌株,验证生化鉴定试剂盒(如 API 20 Strep)、质谱检测平台的准确性,帮助实验室区分屎肠球菌与粪肠球菌;在科研领域,用于肠球菌属系统发育研究、屎肠球菌毒力因子(如黏附蛋白、肠球菌素)功能分析,及抗菌药物(如氨苄西林、利奈唑胺)体外活性评价;在微生物教学中,作为演示肠球菌属菌种差异的典型菌株,帮助学习者掌握革兰氏阳性球菌的鉴别方法。
安全:需在生物安全二级(BSL-2)实验室操作(因存在医院感染传播风险);涉及菌液移液、离心等可能产生气溶胶的操作时,需在生物安全柜内进行,操作人员需佩戴无菌手套、口罩及护目镜,避免菌液接触破损皮肤。实验后,所有污染耗材(培养皿、吸头、离心管)需经 121℃高压灭菌 30 分钟,实验台面用含氯消毒剂(有效氯 1000mg/L)擦拭消毒,再用 75% 乙醇二次消毒。菌株储存需单独存放于专用冰箱,冻存管外清晰标注菌株名称、编号、保存日期及 “屎肠球菌” 类别,防止与粪肠球菌或其他菌株交叉污染。


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