形态与生化：菌体呈短杆状，大小（0.4-0.9）μm×（1.0-2.5）μm，无芽孢，周生鞭毛（运动性活跃）。最适生长温度 37℃，适宜 pH 6.5-7.5，兼性厌氧（有氧环境下菌落形成速度快，菌落饱满；无氧时可通过发酵葡萄糖产酸产气供能，生长速度略缓）；生化特征高度标准且稳定：发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖均产酸产气，氧化酶阴性，触酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，吲哚试验阳性，甲基红试验阳性，VP 试验阴性，不能利用柠檬酸盐作为唯一碳源（与肠杆菌属、柠檬酸杆菌属的核心鉴别点），这些生化反应结果是大肠杆菌鉴定的 “标准模板”，确保其在各类质控实验中结果的一致性与可靠性。
致病性相关：属于非致病菌株，自然定植于人和温血动物肠道，是肠道正常菌群的重要组成部分，不携带肠毒素、志贺毒素、黏附素等致病因子，无引发肠道感染（如腹泻、肠炎）或全身感染（如败血症、尿路感染）的能力；因无致病性且生物学特性稳定，常作为 “安全模式株”，用于与致病性大肠杆菌（如肠出血性大肠杆菌 EHEC O157:H7、产肠毒素大肠杆菌 ETEC）的对比研究，及初阶微生物实验（如教学实验、新手操作训练）。
培养：无需特殊气体环境，常规有氧培养即可满足需求。推荐培养基包括：营养琼脂（NA，用于菌株活化与纯培养，菌落呈乳白色、表面光滑湿润，直径 1.0-2.0mm，质地柔软无异味）、麦康凯琼脂（MAC，因发酵乳糖，菌落呈粉红色，边缘整齐，直径 1.0-1.8mm，可快速区分于非发酵乳糖的肠道致病菌）、伊红美蓝琼脂（EMB，菌落呈紫黑色，中心具鲜明金属光泽，鉴别特征显著，是大肠杆菌的 “标志性菌落形态”，便于快速识别与纯化）、乳糖发酵管（用于验证产酸产气特性，培养后管内出现浑浊、产酸变色及气泡）。37℃培养 16-24 小时后，各类培养基上均能形成典型菌落，符合质控实验对菌株形态与生化反应的要求。
保存：短期保存（1-4 周）：将活化后的纯菌株接种至营养琼脂斜面，37℃培养 12-16 小时后，密封斜面管口（防止水分流失导致菌株脱水失活，同时避免杂菌污染），置于 4℃冰箱冷藏，期间每 2 周观察 1 次菌株生长状态，若出现菌落萎缩、变色或斜面长霉，需立即重新复苏纯化；长期保存（1 年以上）：采用 - 80℃甘油冷冻保存（20% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合，分装至无菌冻存管，标注双 WDCM 编号，避免反复冻融破坏菌株特性），或冻干保存（以 10% 脱脂乳为保护剂，冻干后置于 - 20℃以下干燥环境，可保存 3 年以上）。复苏时，将冻存菌液或冻干菌粉接入营养肉汤，37℃振荡培养 8-10 小时（转速 180-200rpm），待菌液 OD600 值达 0.5-0.7（对数生长期，活菌数约 10^8 CFU/mL，活性最佳）后，转接固体培养基纯化，复苏后需通过生化反应验证（如乳糖发酵、吲哚试验），确保菌株特性未发生改变。
应用：在食品检测领域，作为食品（如肉制品、乳制品、果蔬）卫生检测的核心质控株，用于验证 “大肠杆菌计数” 方法（如平板计数法、MPN 法）的准确性，及选择性培养基（如 MAC、EMB）的性能（促生长能力与选择性）；在水质安全领域，用于饮用水、污水中 “总大肠菌群” 检测的质控，评估检测流程的可靠性，保障水质安全；在科研与工业领域，作为培养基生产企业的 “出厂质控株”，验证各类培养基（如营养琼脂、生化鉴定培养基）的质量，同时也可用于分子生物学实验的基础对照（如 DNA 提取效率验证）；在教学领域，用于微生物学基础实验，演示革兰氏染色（呈阴性，红色短杆菌）、菌落形态观察、生化反应（如糖发酵试验、吲哚试验），帮助学习者建立对肠道杆菌的基础认知。
安全：常规操作可在生物安全一级（BSL-1）实验室进行（因无致病性，风险等级低）；涉及大规模培养（如制备批量质控菌液）或可能产生气溶胶的操作（如高速离心、菌液移液、平板涂布）时，需佩戴无菌手套、一次性口罩，必要时佩戴护目镜，避免菌液接触破损皮肤或吸入气溶胶；实验结束后，所有污染耗材（培养皿、移液器吸头、离心管、接种环）需经 121℃高压灭菌 30 分钟（确保彻底杀灭菌株，防止环境污染），实验台面用含氯消毒剂（有效氯 1000mg/L）擦拭消毒，再用 75% 乙醇二次消毒；菌株储存需单独存放于专用冰箱，冻存管外清晰标注 “ATCC 8739 大肠杆菌（WDCM 00012, WDCM 00196）- 非致病质控株”、保存日期及操作人员，严禁与致病性大肠杆菌（如 O157:H7、O104:H4）混合存放，避免交叉污染导致质控结果偏差。
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