形态与生化:菌体呈细长梭形或杆状,大小(0.5-1.0)μm×(5.0-10.0)μm,两端尖细,无芽孢,无鞭毛(无运动性),常呈单个或短链状排列。最适生长温度 35-37℃,严格厌氧(需在含 5% CO?、10% H?、85% N?的厌氧环境中生长,氧分压<0.5%),适宜 pH 7.0-7.5;生化特征具属种特异性:发酵葡萄糖、果糖、麦芽糖产酸(不产气),不发酵乳糖、蔗糖,氧化酶阴性,触酶阴性,硝酸盐还原试验阳性,能产生吲哚(吲哚试验阳性),可水解七叶苷,发酵代谢产物以丁酸为主(具特殊酸臭味,培养后可通过气味辅助鉴别),这些稳定的生化与形态特征是具核梭杆菌与其他厌氧菌(如脆弱拟杆菌)精准区分的关键依据。
致病性相关:属于条件致病菌,是人类口腔正常菌群的重要成员,主要定植于牙龈沟、牙周袋等部位;当口腔微生态失衡(如牙周病、龋齿)或机体免疫力下降时,可引发口腔局部感染(如牙周炎、牙髓炎、颌骨骨髓炎),还可通过血液扩散导致全身性感染(如败血症、肝脓肿、脑脓肿),且与结直肠癌等消化道疾病的发生发展存在关联。ATCC 25586 毒力特性明确,携带黏附素、毒素相关基因,主要用于厌氧菌致病机制(如口腔黏膜黏附、炎症因子诱导)研究,及临床厌氧菌感染检测的阳性对照株。
培养:需严格厌氧环境,推荐使用厌氧培养箱或厌氧产气袋构建厌氧体系。推荐培养基包括:强化梭菌琼脂(RCA,用于菌株活化与纯培养,菌落呈圆形、半透明至乳白色,直径 1.0-2.0mm,边缘整齐,质地柔软,培养 48-72 小时后菌落中心可出现凹陷)、脑心浸液厌氧琼脂(BHI 厌氧琼脂,添加维生素 K?和氯化血红素以促进生长,菌落形态与 RCA 相似)、厌氧血琼脂(含 5% 绵羊血,菌落周围无溶血环,可与溶血厌氧菌区分)。37℃厌氧培养 48-72 小时后,形成典型菌落,且培养基可出现特殊酸臭味,便于鉴别。
保存:短期保存(1-2 周):将活化后的纯菌株接种至 BHI 厌氧琼脂斜面,37℃厌氧培养 24-48 小时后,立即置于厌氧袋中密封,4℃冰箱冷藏,期间需每周观察 1 次(因专性厌氧菌对氧敏感,低温保存易失活,需缩短保存周期),若出现菌落萎缩、变色或污染需立即重新活化;长期保存(1 年以上):采用 - 80℃甘油冷冻保存(30% 无菌甘油与对数期菌液按 1:1 体积混合,分装至无菌冻存管,全程在厌氧环境下操作,避免菌液接触空气),或冻干保存(以 10% 脱脂乳 + 0.5% 葡萄糖为保护剂,冻干过程需维持厌氧,冻干后置于 - 20℃以下干燥厌氧环境)。复苏时,将冻存菌液或冻干菌粉在厌氧环境下接入 BHI 厌氧肉汤,37℃厌氧振荡培养 24-36 小时(转速 100-150rpm,避免剧烈振荡破坏菌体),待菌液浑浊后转接厌氧固体培养基纯化,复苏后需通过形态观察(梭形菌体)、生化反应(吲哚阳性、不发酵蔗糖)验证,确保菌株特性未改变。
应用:在口腔医学领域,作为口腔菌群研究的模式株,用于探索具核梭杆菌与其他口腔微生物(如牙龈卟啉单胞菌)的互作机制,及牙周病发病机制(如炎症反应诱导、牙周组织破坏)研究;在临床检测领域,作为厌氧菌分离鉴定的质控株,验证厌氧培养体系(如厌氧箱性能)、生化鉴定试剂盒(如 API 20A)的有效性,帮助实验室准确诊断厌氧菌感染;在科研领域,用于厌氧菌抗菌药物(如甲硝唑、克林霉素)体外活性评价,及厌氧菌毒力因子(如 FadA 黏附素)功能分析;在教学领域,用于微生物学实验,演示专性厌氧菌的形态特征、厌氧培养操作及鉴别方法,帮助学习者掌握厌氧菌研究核心技术。
安全:需在生物安全二级(BSL-2)实验室的厌氧操作环境中进行(因可引发全身感染,且培养过程需严格控氧);涉及菌液移液、接种等操作时,需在厌氧生物安全柜内进行,操作人员需佩戴无菌手套、口罩、护目镜,避免皮肤接触菌液或吸入含菌气溶胶(培养后菌液具特殊气味,需加强通风);实验后,所有污染耗材(培养皿、吸头、离心管、接种环)需经 121℃高压灭菌 60 分钟以上(确保彻底杀灭专性厌氧菌),实验台面用含氯消毒剂(有效氯 2000mg/L)擦拭消毒,再用 75% 乙醇二次消毒;菌株储存需单独存放于专用厌氧保存箱(-80℃冰箱),冻存管清晰标注 “ATCC 25586 具核梭杆菌(专性厌氧菌)- 致病菌”、保存日期及操作人员,严禁与需氧菌混合存放,防止交叉污染与实验室感染。


客服1