ATCC 43300 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)产品说明
一、菌株基本信息
ATCC 43300 是美国典型培养物保藏中心(ATCC)收录的经典标准金黄色葡萄球菌菌株,获世界微生物菌种保藏中心联合会(WDCM)编号 WDCM 00211,属厚壁菌门葡萄球菌科葡萄球菌属,为革兰氏阳性兼性厌氧球菌。其生物学特性经 CLSI 长期认证,是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)研究领域的 “标杆菌株”,广泛用于 MRSA 检测方法开发、耐药机制研究及抗 MRSA 药物评价,在临床医学、微生物科研及体外诊断试剂领域实用价值不可替代。
二、核心特性
菌体呈球形(直径 0.8-1.0μm),光学显微镜下呈典型葡萄串状排列,无芽孢、无鞭毛(无运动性),部分菌株可形成薄荚膜,革兰氏染色呈强阳性(细胞壁着色均匀)。最适生长温度 35-37℃,兼性厌氧,营养需求中等;在血琼脂平板上形成直径 1-2mm 的圆形菌落,表面光滑、凸起、具金属光泽,呈典型金黄色,周围环绕清晰的 β- 溶血环(完全溶解绵羊红细胞,与非致病性表皮葡萄球菌的不溶血特性核心鉴别);发酵葡萄糖、麦芽糖产酸不产气,不发酵乳糖、蔗糖,触酶试验阳性(滴加 3% 过氧化氢立即产生大量气泡,与链球菌区分),血浆凝固酶阳性(4 小时内使兔血浆凝固,确认致病性);携带完整的 mecA 基因(位于 SCCmec I 型元件上,是 MRSA 耐药的分子标志),对甲氧西林、青霉素类、头孢类(除头孢洛林外)抗生素固有耐药,药敏谱被 CLSI 列为 MRSA 检测的 “标准参照”,可与敏感型金黄色葡萄球菌(如 ATCC29213)及其他 MRSA 菌株(如 ATCC33591)通过 SCCmec 分型精准区分。属医院感染常见致病菌,模拟临床 MRSA 的毒力与耐药表型,是验证检测方法特异性的理想对照。
三、培养与保存
推荐使用标准化培养基:血琼脂平板(含 5% 绵羊红细胞,pH7.2-7.4,用于观察菌落形态、色素及溶血特性,确保 β- 溶血环清晰)、MH 琼脂(含 2% NaCl,AST 专用,培养基厚度 4±0.5mm,表面平整,避免影响药敏结果重复性,是 MRSA 耐药性检测的指定培养基)。35℃培养 18-24 小时,活菌数稳定达 10^8-10^9 CFU/mL,且菌落形态、耐药表型无批次差异。短期保存可将 MH 琼脂斜面菌株置于 4℃密封冷藏(1-2 周,避免反复冻融导致 mecA 基因稳定性下降);长期保存需采用 - 80℃甘油冷冻法(20% 无菌甘油 + 含 2% NaCl 的 MH 肉汤保护剂,梯度降温至 - 80℃,减少冰晶对菌体损伤)或冻干保存(1 年以上,冻干后置于 - 20℃以下干燥避光环境,密封防吸潮,复苏后活菌回收率≥90%)。复苏后必须验证三项关键指标:①血琼脂上的金黄色菌落与 β- 溶血环;②触酶、血浆凝固酶阳性;③对甲氧西林的耐药性(MIC≥4μg/mL,符合 CLSI MRSA 判定标准)。
四、应用与安全
应用上,其核心价值在于 “标准化参照”:①作为 CLSI 推荐的 MRSA 检测 “基准菌株”,用于验证 MRSA 检测试剂(如乳胶凝集法、PCR 法检测 mecA 基因)的准确性与特异性,是体外诊断试剂注册审批的强制对照;②校准抗 MRSA 药物(如万古霉素、利奈唑胺、达托霉素)的 AST MIC 判读范围,确保临床药敏结果可靠;③用于 MRSA 耐药机制研究(如 SCCmec 元件转移、mecA 基因表达调控)及抗 MRSA 新药研发的体外活性评价;④在微生物教学中,作为 MRSA 特性演示的标准菌株,帮助理解耐药菌的生物学特征。安全方面,需在 BSL-2 实验室操作,气溶胶相关操作(如菌液稀释、平板涂布、菌落挑取)必须在二级生物安全柜内进行,操作人员需佩戴 N95 口罩、无菌防护服及一次性无菌手套;污染耗材(培养皿、吸头、离心管)需经 121℃高压灭菌 60 分钟后处理,含菌废液需加 1% 含氯消毒剂混匀,处理 60 分钟后排放;菌株需单独存放于双锁生物安全冰箱,外贴 “ATCC 43300 金黄色葡萄球菌(WDCM 00211)- 经典 MRSA 标准株,医院感染致病菌” 警示标识,建立全流程领用、使用、归还台账,严格管控流向,严防实验室感染及菌株滥用。


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