Baird-Parker 琼脂上：菌落呈黑色、圆形凸起，周围有透明晕圈，中心因卵磷脂酶作用形成黑色沉淀（特征性表现，与沙门氏菌无色半透明菌落鉴别）；
TSA 上：菌落呈金黄色、圆形光滑，表面有光泽，培养 48 小时后直径可达 2-3mm（与沙门氏菌无色菌落差异显著）；
液体培养（胰酪大豆胨肉汤，TSB）：呈均匀浑浊，后期因菌体聚集出现少量沉淀（无色素，与沙门氏菌液体培养特性鉴别）。
活化：取冻干菌粉，加入 2mL 无菌 TSB，涡旋振荡 1 分钟使菌粉溶解，37℃、180rpm 振荡培养 16 小时；
纯化：取 0.1mL 活化菌液涂布 Baird-Parker 琼脂平板，37℃培养 24 小时，挑取黑色带透明晕圈的单菌落；
扩繁：将单菌落接种至 50mL TSB，37℃、180rpm 振荡培养 18 小时，制得浓度 10?-10? CFU/mL 的菌悬液（可通过麦氏比浊法校准）。
浓度校准：采用涂布计数法，取菌悬液 10 倍梯度稀释至 10??、10??，取 0.1mL 涂布 TSA 平板（3 个平行），37℃培养 24 小时计数，误差需控制在 ±0.2 log 内；
鉴别特征：
形态：革兰氏染色呈阳性球形（直径 0.8-1.0μm），呈葡萄串状排列（与沙门氏菌短杆状、散在排列鉴别）；
生化：触酶阳性（滴加过氧化氢产生气泡，与沙门氏菌触酶阳性一致，但通过形态进一步区分）、发酵甘露醇产酸（与沙门氏菌不发酵甘露醇鉴别）、血浆凝固酶试验阳性（加入兔血浆后 24 小时内凝固，金黄色葡萄球菌特异性鉴别）。
个人防护：穿全包裹式防护服、戴 N95 口罩（防止菌雾吸入）及护目镜，操作后用 75% 乙醇消毒手部，若接触含菌高盐食品模拟样本，需额外用生理盐水冲洗手部；
环境消毒：实验后用 0.5% 过氧乙酸喷雾消毒生物安全柜，作用 20 分钟后擦拭，紫外灯照射 30 分钟（菌体附着性低于沙门氏菌，无需延长消毒时间）；地面、操作台每周用 0.2% 含氯消毒剂擦拭；
废弃物处理：含菌培养物需 121℃高压灭菌 30 分钟（与 ATCC14028 一致，需彻底灭活肠毒素与菌体）；高盐食品模拟样本（如腌肉匀浆）需先加入等量 10% 次氯酸钠溶液浸泡 30 分钟，再灭菌处理；耗材按医疗有害废弃物分类。
长期存储（推荐）：
冻干法：将对数期菌悬液与 12% 脱脂乳 + 8% 蔗糖保护剂 1:1 混合，冻干后密封，4℃冷藏存放，保质期 4-5 年，存活率≥90%（肠毒素产毒能力稳定性优于普通存储方式）；
-80℃冷冻法：菌悬液与 50% 无菌甘油按 1:1 混合（甘油终浓度 25%，避免损伤菌体），分装冻存管快速冻存，保质期 3-4 年（反复冻融不超过 2 次，否则影响产毒特性）；
短期存储（1 个月内）：将菌液接种至 TSA 斜面，37℃培养 24 小时后，4℃冷藏存放，每 7 天传代 1 次，防止菌株退化；
存储管理：单独存放于双锁生物安全冰箱的致病菌区域，与 ATCC14028 等致病菌分区（避免交叉污染影响生化鉴别）；标签注明 “金黄色葡萄球菌（ATCC6538，WDCM 00032/00193）”“BSL-2 级”“存储日期”，实行双人双锁领用制度，领用记录需注明 “食品检测” 或 “药敏试验” 用途，严防泄漏引发食物中毒或皮肤感染模拟事故。
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