中文名称：无害李斯特菌
拉丁学名：Listeria innocua
标准编号：ATCC33090、WDCM 00017
产品形式：冻干粉（含海藻糖 - 脱脂乳复合保护剂，减少冻干对菌体的渗透压损伤，复苏率≥90%）
安全等级：2 级（条件致病性菌株，对健康人群无致病性，仅免疫缺陷人群存在极低感染风险，适用于生物安全二级实验室（BSL-2）常规操作）
模式菌株：非模式菌株（是李斯特菌属中分布最广泛、研究最深入的非致病菌株，常作为致病性李斯特菌检测的核心对照菌株）
分类地位：隶属于李斯特菌科、李斯特菌属，与致病性单核细胞增生李斯特菌同属，广泛存在于土壤、植物、食品（如乳制品、肉制品）及食品加工环境中，是李斯特菌属中常见的非致病代表菌株
形态特征：菌落呈乳白色至灰白色，直径 1-2.5mm，表面光滑、湿润，边缘整齐或轻微不规则，质地黏稠且半透明，在李斯特菌选择性培养基（如 PALCAM 培养基、Oxford 培养基）上呈无色菌落，周围无溶血环（与单核细胞增生李斯特菌的 β- 溶血特性形成鲜明区分）；菌体为革兰氏阳性，呈短杆状，大小约 0.4-0.7μm×1.0-2.5μm，常单个、成对或短链状排列，无芽孢，有周生鞭毛（20-25℃时运动活跃，呈 “翻筋斗” 样运动，37℃时运动能力显著减弱），革兰氏染色后显微镜下观察形态清晰。
生理特性：兼性厌氧菌，生长温度范围极宽（0-45℃，具备超强低温适应性，可在 0-4℃冷藏环境中缓慢繁殖，是食品低温储存过程中微生物监测的重要指标），最适生长温度 30-37℃，生长 pH 范围 5.0-9.5，耐盐性强（可在含 10% NaCl 的培养基中正常生长）；能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、海藻糖等糖类产酸不产气，不发酵木糖、甘露醇、鼠李糖，甲基红试验阳性，V-P 试验阳性，不产生吲哚，不分解尿素，触酶试验阳性；无致病性，不携带李斯特菌溶血素 O（LLO）、内化素（InlA/B）等毒力基因，不能在人体巨噬细胞内寄生繁殖，也无法引起动物感染症状。
培养条件：推荐使用李斯特菌选择性培养基（如 PALCAM 培养基含头孢他啶、多粘菌素 B 等抑制剂，Oxford 培养基含吖啶黄、多粘菌素 B）或营养琼脂培养基，37℃有氧培养 24-48h（普通培养箱静置培养即可，无需厌氧环境，含 5% CO?环境可促进菌落密集生长），培养后在选择性培养基上可有效抑制杂菌，仅李斯特菌属菌株生长；液体培养选用营养肉汤培养基或李斯特菌增菌肉汤（LEB），37℃振荡培养（转速 150-200rpm）18-24h，菌体浓度可达 10?-10??CFU/mL；若需观察运动性，建议在 22℃培养 24h，运动特征更明显。
活化步骤：在生物安全二级实验室生物安全柜内操作，无菌环境下开启安瓿管，用 0.5-1mL 无菌营养肉汤培养基（预热至 37℃）充分溶解菌粉，将菌液全部接种至营养琼脂平板，37℃培养 24h 后，挑取单个典型菌落转接至 5mL 李斯特菌增菌肉汤，37℃振荡培养 16h，即可获得高活性种子液（操作时避免菌液飞溅，防止气溶胶污染）。
保存方法：未启封冻干粉 2-8℃密封避光保存，有效期 5 年；复苏后斜面菌种 4℃密封保存，每 1 个月继代一次，有效期 2 个月；长期保存需将对数生长期菌液与 30% 无菌甘油按 1:1 体积比混合，分装至冻存管后 - 80℃冷冻保存，或真空冷冻干燥后 - 20℃保存，有效期均可达 4-5 年，严禁反复冻融（单次冻融活性损失≥20%）。
食品微生物检测：作为食品中李斯特菌检测的首选阴性对照菌株，用于验证李斯特菌选择性培养基的特异性（区分非致病与致病李斯特菌）、检测方法（如实时荧光定量 PCR、免疫磁珠分离法、酶联免疫吸附法）的准确性与灵敏度，同时可作为食品加工环境（如车间台面、设备、人员手部）李斯特菌污染监测的阳性参照，助力食品企业建立完善的微生物控制体系，符合 GB 4789.30-2022《食品安全国家标准 食品微生物学检验 李斯特菌检验》要求。
微生物鉴定与质控：用于微生物鉴定试剂（如生化鉴定卡、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF MS））的校准与验证，确保李斯特菌属菌株鉴定结果的可靠性；作为食品、药品微生物实验室质量控制的标准菌株，用于验证实验流程的稳定性、培养基的适用性及检测人员的操作规范性。
科研与教学：作为李斯特菌属分类学研究的重要材料，通过与单核细胞增生李斯特菌的基因序列、生化特性对比，明确李斯特菌属的系统发育关系；用于微生物学教学实验（如细菌运动性观察、低温生长试验、选择性培养基筛选实验），帮助学生掌握李斯特菌属的核心生物学特征；同时作为李斯特菌毒力机制研究的对照菌株，用于探索致病菌株毒力基因的表达调控，为李斯特菌病的防控技术研发提供实验模型。
每批次产品均通过四重质量检测：纯度检测（涂布营养琼脂、李斯特菌选择性培养基及血琼脂平板，确保无杂菌污染且无溶血现象）、活性检测（平板计数法，确保活菌数≥10?CFU / 支）、特性验证（API Listeria 生化鉴定、16S rRNA 基因测序及毒力基因检测，确认无致病基因）、稳定性检测（37℃加速试验验证保存期内活性稳定），随货附带完整 COA（分析报告），质量可追溯。
操作需在生物安全二级实验室进行，实验人员需经专业培训，穿戴无菌手套、口罩及实验服，使用生物安全柜处理菌液；实验废弃物（含菌培养基、耗材、防护用品）需经 121℃高压蒸汽灭菌 30min 后处理；若发生菌液泄漏，需立即用 75% 乙醇或 500mg/L 含氯消毒剂擦拭消毒污染区域，并通风 30 分钟以上；收货后 24 小时内，若发现安瓿管破损、菌粉变色或复苏后无活菌，可立即联系售后办理退换货（退换货需符合微生物运输安全规范）。
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