中文名称：威尔士李斯特菌
拉丁学名：Listeria welshimeri
标准编号：ATCC35897
产品形式：冻干粉（含蔗糖 - 脱脂乳复合保护剂，减少冻干过程中菌体活性损伤，复苏率≥85%）
安全等级：2 级（条件致病性菌株，对健康人群无明确致病性，仅免疫缺陷人群存在极低感染风险，适用于生物安全二级实验室（BSL-2）常规操作）
模式菌株：非模式菌株（是李斯特菌属中典型的非致病菌株，因独特的生化特性与环境适应性，成为李斯特菌属分类鉴定、环境微生物研究的重要参照菌株）
分类地位：隶属于李斯特菌科、李斯特菌属，与单核细胞增生李斯特菌同属一科，广泛存在于土壤、水体、植物表面、动物粪便及食品加工环境中，是李斯特菌属中研究较多的非致病代表菌株，因纪念微生物学家 Harry J. Welshimer 而命名。
形态特征：菌落呈灰白色，直径 1-2mm，表面光滑、湿润，边缘整齐或轻微不规则，质地黏稠且半透明，在李斯特菌选择性培养基（如 PALCAM 培养基、Oxford 培养基）上呈无色菌落，在血琼脂平板上无溶血环（与单核细胞增生李斯特菌的狭窄 β- 溶血环、西利杰李斯特菌的宽大 β- 溶血环形成关键区分，是威尔士李斯特菌的核心鉴别特征）；菌体为革兰氏阳性，呈短杆状，大小约 0.5-0.8μm×1.0-2.0μm，常单个、成对或短链状排列，无芽孢，有周生鞭毛（20-25℃时运动活跃，呈 “翻筋斗” 样运动，37℃时运动能力显著减弱），革兰氏染色后显微镜下形态清晰。
生理特性：兼性厌氧菌，生长温度范围 1-42℃（具备较强低温生长能力，可在 0-4℃冷藏环境缓慢繁殖，是低温环境微生物监测的重要指标），最适生长温度 30-37℃，生长 pH 范围 5.5-9.0，耐盐性较强（可在含 8% NaCl 的培养基中生长）；能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖产酸不产气，不发酵鼠李糖、木糖、甘露醇、海藻糖，甲基红试验阳性，V-P 试验阳性，不产生吲哚，不分解尿素，触酶试验阳性；无明确致病性，不携带单核细胞增生李斯特菌的核心毒力基因（如hly、inlA、plcA），不能在人体巨噬细胞内寄生繁殖，也无法引起动物感染症状，环境适应性强于其他非致病李斯特菌。
培养条件：推荐使用李斯特菌选择性培养基（如 PALCAM 培养基含头孢他啶、多粘菌素 B，Oxford 培养基含吖啶黄、多粘菌素 B）或营养琼脂培养基，37℃有氧培养 24-48h（普通培养箱静置培养即可，无需厌氧环境，含 5% CO?可促进菌落密集生长），培养后在选择性培养基上可抑制杂菌，血琼脂平板上无溶血特征；液体培养选用营养肉汤培养基或李斯特菌增菌肉汤（LEB），37℃振荡培养（转速 150-200rpm）18-24h，菌体浓度可达 10?CFU/mL；若需观察运动性，建议在 22℃培养 24h，运动特征更显著。
活化步骤：在生物安全二级实验室生物安全柜内操作，无菌环境下开启安瓿管，用 0.5-1mL 无菌营养肉汤培养基（预热至 37℃）充分溶解菌粉，将菌液全部接种至营养琼脂平板，37℃培养 24h 后，挑取单个典型菌落转接至 5mL 李斯特菌增菌肉汤，37℃振荡培养 16h，即可获得高活性种子液（操作时避免菌液飞溅，防止气溶胶产生）。
保存方法：未启封冻干粉 2-8℃密封避光保存，有效期 4 年；复苏后斜面菌种 4℃密封保存，每 1-2 个月继代一次，有效期 2 个月；长期保存需将对数生长期菌液与 30% 无菌甘油按 1:1 体积比混合，分装至冻存管后 - 80℃冷冻保存，或真空冷冻干燥后 - 20℃保存，有效期均可达 3-5 年，严禁反复冻融（单次冻融活性损失≥25%）。
微生物分类与鉴定研究：作为李斯特菌属分类学研究的重要材料，通过与致病李斯特菌（如单核细胞增生李斯特菌）、其他非致病李斯特菌（如无害李斯特菌、格氏李斯特菌）的生化特性、基因序列对比，明确李斯特菌属的系统发育关系；作为微生物鉴定试剂（如生化鉴定卡、MALDI-TOF MS 质谱数据库）的校准菌株，验证鉴定方法的准确性，尤其用于区分无溶血特性的非致病李斯特菌与致病菌株，解决非致病李斯特菌间的鉴别难题。
食品安全与环境监测：作为食品、环境样本中李斯特菌检测的阴性对照菌株（与单核细胞增生李斯特菌对比），用于验证李斯特菌选择性培养基的特异性、检测方法（如实时荧光定量 PCR、免疫磁珠分离法）的可靠性，评估食品加工环境（如车间台面、设备、冷链环节）及低温储存食品中李斯特菌的污染组成，为食品安全风险分级提供数据支撑；同时可用于低温环境（如冷藏库、冷链运输）微生物多样性研究，探索其在低温环境中的存活与繁殖规律，为低温环境微生物防控提供理论基础。
教学与科研实验：用于微生物学教学实验（如细菌运动性观察、低温生长试验、选择性培养基应用、革兰氏染色），帮助学生掌握李斯特菌属的形态与生理特性，理解致病与非致病菌株、非致病菌株间的鉴别要点；作为李斯特菌低温适应性研究的模型菌株，探索其低温生长相关基因的表达调控机制与耐低温生理特性，为低温微生物代谢机制研究提供实验材料，也可用于食品低温保鲜技术研发中的微生物对照实验。
每批次产品均通过三重质量检测：纯度检测（涂布营养琼脂、李斯特菌选择性培养基及血琼脂平板，确保无杂菌污染且无溶血特征）、活性检测（平板计数法，确保活菌数≥10?CFU / 支）、特性验证（API Listeria 生化鉴定、16S rRNA 基因测序，符合威尔士李斯特菌典型生理生化与基因特征，且确认无核心毒力基因），随货附带完整 COA（分析报告），质量可追溯。
操作需在生物安全二级实验室进行，实验人员需经专业培训，穿戴无菌手套、口罩与实验服，使用生物安全柜处理菌液；实验废弃物（含菌培养基、耗材）需经 121℃高压蒸汽灭菌 30min 后处理；若发生菌液泄漏，需立即用 75% 乙醇或 500mg/L 含氯消毒剂擦拭消毒污染区域；收货后 24 小时内，若发现安瓿管破损、菌粉变色或复苏后出现溶血菌落，可立即联系售后办理退换货。
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