形态：革兰氏阴性短杆菌，显微镜下呈直杆状排列（单生或短链状，与唾液链球菌的球菌形态明确区分），无芽孢，具周生鞭毛（可自主运动，与多数无鞭毛的口腔链球菌区分），部分菌株表面具 Vi 抗原（荚膜样结构，经特殊染色可见），大小约 0.5-0.8μm×1.0-2.0μm。在普通营养琼脂上生长良好，形成直径 1.0-2.0mm 的乳白色半透明菌落，质地湿润、表面光滑，边缘整齐（无口腔链球菌的溶血环特征）；在 SS 选择性培养基（含胆盐、煌绿）上呈无色透明菌落，因产硫化氢（H?S），菌落中心形成黑色斑点（与唾液链球菌在选择性培养基上的乳白色菌落明确区分）；在麦康凯培养基上呈无色透明菌落（不发酵乳糖，与发酵乳糖的大肠杆菌红色菌落区分）；在 XLD 培养基（木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂）上呈红色菌落，中心黑色（H?S 阳性），此杆状形态、H?S 阳性、乳糖不发酵是关键鉴别标志。
生理生化：兼性厌氧微生物，最适生长温度 35-37℃（适配人体肠道温度，25-42℃范围内均可生长，耐受温度范围宽于唾液链球菌），最适 pH 值 6.8-7.4（耐酸性中等，可在 pH4.0-9.0 环境短期存活，与唾液链球菌的弱耐酸性区分），对营养要求低，在普通营养琼脂、LB 培养基、TSB 培养基中均可快速生长（无需口腔链球菌依赖的特殊营养）。生化反应中，触酶试验阳性（与唾液链球菌的触酶阴性明确区分），氧化酶试验阴性，硝酸盐还原试验阳性（可还原为亚硝酸盐），吲哚试验阴性，甲基红试验阳性，VP 试验阴性（与唾液链球菌的 VP 阳性区分）；关键生化特性为发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇（产酸产气，与唾液链球菌的产酸不产气区分），不发酵乳糖、蔗糖、阿拉伯糖，尿素酶试验阴性，赖氨酸脱羧酶试验阳性；毒力特性上，携带肠道致病相关毒力基因（如侵袭基因 invA、毒力岛 SPI-1/SPI-2、内毒素基因 tolC），对肠道上皮细胞黏附与侵袭能力极强（通过 SPI-1 调控侵袭过程），代谢过程不产抗菌物质（与唾液链球菌的益生抗菌特性完全相反），主要引发人类急性胃肠炎（腹痛、腹泻、发热），严重时可致败血症，是全球食源性疾病的主要致病菌之一。
培养基：常规培养优先选用 LB 培养基或 TSB 培养基（35-37℃培养 18-24 小时，无需特殊添加物，与唾液链球菌的 BHI 培养基区分）；食品样本（如肉类、蛋类、乳制品）分离推荐使用 SS 培养基、XLD 培养基或 RV 增菌液（先增菌后分离，提升低浓度污染检出率）；临床样本（如粪便、呕吐物）分离可搭配 GN 增菌液（抑制杂菌，富集沙门氏菌）；药物敏感性试验需采用 MH 培养基（符合 CLSI 临床标准，与唾液链球菌一致，但接种浓度与培养时间不同）；毒力研究需使用含肠道上皮细胞（如 Caco-2 细胞）的共培养体系（模拟体内感染环境）。
操作：固体培养置于 35-37℃恒温培养箱（无需 CO?环境，与唾液链球菌的 CO?需求区分）静置 18-24 小时，可形成形态典型的单菌落（选择性培养基上重点观察菌落颜色与中心黑斑）；液体培养采用 35-37℃、150-180rpm 摇床振荡培养 16-20 小时（振荡速率与唾液链球菌相当，促进菌体均匀生长），培养后期菌液呈均匀浑浊状（无黏性沉淀，与变形链球菌区分），菌浓度可达 10?-10??CFU/mL，且能最大程度保留肠道侵袭能力。传代次数建议控制在 5 代以内，温度波动需≤±1℃，避免因传代过多导致毒力基因表达下降或 H?S 产生能力减弱。
短期（1-2 周）：取 35-37℃培养 18 小时的纯培养菌株（需确认乳糖不发酵、H?S 阳性、杆状形态），接种至营养琼脂斜面培养基，35℃培养 12 小时后，密封斜面管口置于 4℃冰箱冷藏保存。每 3-4 天观察一次菌株状态，若发现菌落干燥、污染、H?S 阳性减弱，需及时重新接种（35-37℃复壮，无需 CO?），防止菌株失活或致病特性改变。
长期（3 年以上）：推荐两种高效保存方法：①冷冻干燥保存法：取对数生长期菌液（OD600=0.8-1.0，培养 16 小时，TSB 培养基），与含 10% 脱脂乳 + 0.5% 酵母提取物的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀（无需添加蔗糖，与唾液链球菌的保护剂成分一致但适配杆菌特性），分装至无菌冷冻管（每管 0.5mL），经 - 20℃预冻 3 小时、-80℃冷冻 6 小时梯度降温后进行冷冻干燥，干燥完成后置于 - 80℃冰箱保存，保存期限可达 5-8 年，复苏后肠道侵袭能力与生化特性保留率≥95%；②甘油冷冻保存法：将对数生长期菌液与无菌甘油（终浓度 20%，与唾液链球菌一致）混合均匀，分装至无菌冷冻管（每管 1mL），直接放入 - 80℃冰箱保存，保存期限 3-5 年，操作简便（复苏时需接种至 SS 培养基与 TSB 培养基，同时验证核心特性）。长期保存需每 12 个月复苏一次，复苏后通过革兰氏染色（确认杆状形态）、生化反应验证（乳糖不发酵、H?S 阳性）、毒力基因 PCR 检测（invA/SPI-1）及肠道细胞侵袭试验，全面确认菌株纯度、生理活性与致病特性，确保后续实验使用效果。
客服1