形态：典型丝状真菌，显微镜下可见发达的有隔菌丝（直径 2-4μm，与肠沙门氏菌的杆状细菌形态完全不同），菌丝分支繁茂，可形成两种孢子：①大分生孢子：呈长柱形或棒状，3-5 个细胞组成，大小约 4-6μm×10-30μm，壁薄光滑；②小分生孢子：呈圆形或梨形，单细胞，直径 2-3μm，成簇或散生于菌丝侧面（核心鉴别形态，与细菌的无孢子结构区分）。在沙堡弱培养基（SDA）上生长良好，形成直径 2-5cm 的绒毛状或粉末状菌落（培养 1-2 周），初期为白色，后期逐渐变为淡黄色或淡褐色，菌落背面呈棕黄色至棕褐色（与肠沙门氏菌的乳白色半透明菌落明确区分）；不产生色素扩散（部分菌株可轻微扩散），在含放线菌酮的 SDA 培养基上可生长（抑制杂菌，辅助鉴别）；因无运动性、无芽孢（与肠沙门氏菌的鞭毛运动区分），此丝状菌丝、双型孢子、绒毛状菌落是关键鉴别标志。
生理生化：专性需氧微生物（与肠沙门氏菌的兼性厌氧区分），最适生长温度 25-30℃（适配皮肤表面温度，高于 37℃生长受抑制，与肠沙门氏菌的 35-37℃最适温度区分），最适 pH 值 5.5-6.5（偏酸性，与肠沙门氏菌的中性 pH 适应区分），对营养要求中等，需在含碳水化合物（如葡萄糖）与蛋白胨的培养基中生长（依赖角质降解酶获取营养，与细菌的广谱营养利用区分）。生化反应中，不进行细菌类生化试验（无触酶、氧化酶等细菌特征酶，与肠沙门氏菌的触酶阳性区分）；关键生理特性为：能分解葡萄糖、麦芽糖（产酸不产气，代谢模式为真菌有氧呼吸，与细菌的发酵代谢区分），不分解乳糖、蔗糖；可产生角质酶、蛋白酶（降解皮肤角质层，为致病关键酶），能在含毛发的培养基上生长（毛发穿孔试验阳性，与非致病性真菌区分）；毒力特性上，携带角质降解相关基因（如角质酶基因 kerA、蛋白酶基因 prt1），对皮肤角质细胞黏附与侵袭能力强，主要引发人类体癣、股癣、手癣、足癣及甲癣，可通过接触病畜（如兔、猫）或污染物品传播（与肠沙门氏菌的食源性传播区分），无系统性感染风险（仅侵袭浅部组织）。
培养基：常规培养优先选用沙堡弱培养基（SDA，含葡萄糖、蛋白胨、琼脂，25-30℃培养 7-14 天，与肠沙门氏菌的 LB 培养基区分）；分离纯化时推荐使用含氯霉素（50μg/mL）的 SDA 培养基（抑制细菌污染，因真菌对氯霉素不敏感）；鉴别试验需使用毛发穿孔培养基（验证毛发降解能力）、尿素培养基（尿素酶试验阳性，辅助区分毛癣菌种类）；抗真菌药物敏感性试验需采用 RPMI 1640 培养基（含 2% 葡萄糖，符合 CLSI 真菌药敏标准，与细菌的 MH 培养基区分）。
操作：固体培养置于 25-30℃恒温培养箱（需充足氧气，无需 CO?，与肠沙门氏菌的培养温度及气体环境均不同）静置 7-14 天（培养周期远长于细菌的 18-24 小时），定期观察菌落形态与颜色变化（避免过早判定）；液体培养采用 25-30℃、100-120rpm 摇床振荡培养 5-7 天（低速振荡，防止菌丝断裂，与细菌的高速振荡区分），培养后期菌液呈浑浊状（含菌丝碎片与孢子），菌浓度以菌丝干重或孢子数计量（10?-10?孢子 /mL，与细菌的 CFU 计量方式区分），且能最大程度保留角质降解能力。传代次数建议控制在 3-4 代以内（少于细菌的 5 代），避免频繁传代导致孢子生成减少或致病性减弱，温度波动需≤±1℃。
短期（1-3 个月）：取培养 7-10 天的纯培养菌株（需确认菌丝与孢子形态），接种至 SDA 斜面培养基，25℃培养 5 天后，密封管口置于 4℃冰箱冷藏保存（保存期限长于细菌的 1-2 周）。每 2 周观察一次菌株状态，若发现菌落干燥、污染或菌丝发黄，需及时重新接种（25-30℃复壮），防止菌株失活（真菌短期保存稳定性优于细菌）。
长期（5 年以上）：推荐两种高效保存方法（真菌保存方法与细菌差异显著）：①冷冻干燥保存法：取培养 5-7 天的菌丝孢子混合物（用无菌生理盐水洗脱，过滤获取孢子悬液），与含 10% 脱脂乳 + 5% 蔗糖的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀（保护孢子活性，与细菌保护剂成分略有差异），分装至无菌冷冻管（每管 0.5mL），经 - 40℃预冻 4 小时、-80℃冷冻 12 小时梯度降温后进行冷冻干燥，干燥完成后置于 - 20℃冰箱保存（无需 - 80℃，与细菌的长期保存温度区分），保存期限可达 5-8 年，复苏后孢子萌发率≥90%；②沙土管保存法（真菌特色保存法）：取无菌沙土（沙：土 = 3:1，高温灭菌）装入冷冻管，加入适量孢子悬液（浸湿沙土），室温晾干后置于 4℃冰箱保存，保存期限 3-5 年，操作简便且成本低（细菌极少使用此方法）。长期保存需每 18-24 个月复苏一次（复苏周期长于细菌的 12 个月），复苏后通过形态学观察（菌丝与孢子形态）、毛发穿孔试验、尿素酶试验及皮肤角质细胞黏附试验，全面确认菌株纯度、生理活性与致病特性，确�：笮笛槭褂眯Ч�。
客服1