形态：革兰氏阴性弧菌，显微镜下呈弯曲杆状（多为逗号形或 “S” 形，大小约 0.5-0.8μm×1.5-3.0μm，与福赛坦纳菌的细长直杆状形态明确区分），无芽孢，具单极鞭毛（运动性强，呈 “穿梭样” 运动，与福赛坦纳菌的无鞭毛特性区分），部分菌株可形成黏液层（非荚膜结构）。在 TCBS 培养基（硫代硫酸盐 - 柠檬酸盐 - 胆盐 - 蔗糖琼脂）上生长良好，形成直径 1.0-2.0mm 的绿色菌落（不发酵蔗糖，与发酵蔗糖的霍乱弧菌黄色菌落区分），菌落表面光滑、边缘整齐，质地湿润（与福赛坦纳菌的黏性菌落差异显著）；在普通营养琼脂上生长微弱（需添加氯化钠，与福赛坦纳菌的复杂营养需求区分）；在血琼脂培养基上表现为 β- 溶血（部分菌株产生耐热直接溶血素 TDH，形成透明溶血环，与福赛坦纳菌的无溶血特性区分）；在 SS 培养基上呈无色半透明菌落（因嗜盐特性生长较缓慢），此弯曲弧状形态、嗜盐生长、TCBS 培养基绿色菌落是关键鉴别标志。
生理生化：需氧或兼性厌氧微生物（与福赛坦纳菌的专性厌氧特性完全相反），最适生长温度 30-37℃（适配海产品储存与人体肠道温度，与福赛坦纳菌的 35-37℃偏好接近但更广），最适 pH 值 7.5-8.5（偏碱性，与福赛坦纳菌的中性 pH 适应区分），核心特性为嗜盐性：需在含 2%-3% 氯化钠的培养基中生长（无盐环境不生长，高于 6% 氯化钠生长受抑制，与福赛坦纳菌的非嗜盐特性明确区分），对营养要求中等，在含蛋白胨、酵母提取物的培养基中即可良好生长（无需福赛坦纳菌依赖的血液或生长因子）。生化反应中，触酶试验阳性（与福赛坦纳菌的触酶阴性区分），氧化酶试验阳性（弧菌属典型特征，与福赛坦纳菌的氧化酶阴性区分），硝酸盐还原试验阳性；关键生理特性为：发酵葡萄糖、麦芽糖（产酸不产气，与福赛坦纳菌的不发酵糖类区分），不发酵蔗糖、乳糖，分解明胶（产明胶酶），吲哚试验阳性；毒力特性上，携带食源性致病相关基因（如耐热直接溶血素基因 tdh、耐热相关溶血素基因 trh、黏附素基因 vp1680），对肠道上皮细胞黏附与侵袭能力强，通过分泌 TDH 引发肠道黏膜炎症与腹泻，主要引发人类急性胃肠炎（腹痛、腹泻、呕吐），严重时可致败血症（无牙周感染能力，与福赛坦纳菌的牙周致病特性区分），且仅通过海产品传播（与福赛坦纳菌的口腔定植传播区分）。
培养基：常规培养优先选用 TCBS 培养基（含 3% 氯化钠，30-37℃培养 18-24 小时，快速鉴别弧菌种类，与福赛坦纳菌的 CDC 厌氧血琼脂区分）；海产品样本（如虾、蟹、贝类）分离需使用碱性蛋白胨水（APW，含 3% 氯化钠，pH8.4，先增菌 6-8 小时后转接 TCBS 培养基，提升低浓度污染检出率）；药物敏感性试验需采用 MH 培养基（添加 2% 氯化钠，符合 CLSI 弧菌药敏标准，与福赛坦纳菌的厌氧 MH 血琼脂区分）；毒力研究需使用含肠道上皮细胞（如 Caco-2 细胞）的共培养体系（需维持 2% 氯化钠浓度，模拟体内感染环境）。
操作：固体培养置于 30-37℃恒温培养箱（需充足氧气，无需厌氧环境，与福赛坦纳菌的厌氧培养箱完全不同）静置 18-24 小时（培养周期远短于福赛坦纳菌的 5-7 天），可形成形态典型的绿色单菌落（TCBS 培养基上重点观察颜色与形态）；液体培养采用 30-37℃、150-180rpm 摇床振荡培养 12-16 小时（高速振荡促进氧气供应，与福赛坦纳菌的静态厌氧培养区分），培养后期菌液呈均匀浑浊状（含菌体与代谢产物），菌浓度可达 10?-10??CFU/mL（高于福赛坦纳菌的菌浓度），且能最大程度保留 TDH 活性与肠道侵袭能力。传代次数建议控制在 5 代以内（与福赛坦纳菌的 4 代接近），传代过程需维持 2% 氯化钠浓度（避免无盐环境导致菌体失活），温度波动需≤±1℃。
短期（1-2 周）：取 30-37℃培养 18 小时的纯培养菌株（需确认革兰氏阴性弧状、氧化酶阳性、TCBS 绿色菌落），接种至含 2% 氯化钠的营养琼脂斜面培养基，30℃培养 12 小时后，密封斜面管口置于 4℃冰箱冷藏保存（无需厌氧环境，与福赛坦纳菌的充氮冷藏区分）。每 3-4 天观察一次菌株状态，若发现菌落干燥、污染或无盐环境暴露后生长异常，需及时在含 2% 氯化钠的培养基上重新接种复壮，防止菌株因盐浓度不适失活。
长期（3 年以上）：推荐两种高效保存方法（需适配嗜盐特性，与福赛坦纳菌差异显著）：①冷冻干燥保存法：取对数生长期菌液（培养 12 小时，用含 2% 氯化钠的生理盐水洗脱），与含 10% 脱脂乳 + 0.5% 酵母提取物 + 2% 氯化钠（维持嗜盐环境，保护菌体结构）的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀，分装至无菌冷冻管（每管 0.5mL），经 - 20℃预冻 3 小时、-80℃冷冻 6 小时梯度降温后进行冷冻干燥，干燥完成后置于 - 80℃冰箱保存（与福赛坦纳菌的 - 80℃保存一致，但保护剂含氯化钠），保存期限可达 5-8 年，复苏后 TDH 活性与嗜盐特性保留率≥95%；②甘油冷冻保存法：将对数生长期菌液与含 2% 氯化钠的无菌甘油（终浓度 20%）混合均匀，分装至无菌冷冻管（每管 1mL），直接放入 - 80℃冰箱保存，保存期限 3-5 年，操作简便（复苏时需接种至 TCBS 培养基，验证绿色菌落特性）。长期保存需每 12 个月复苏一次（与福赛坦纳菌的复苏周期一致），复苏后通过革兰氏染色（确认弧状形态）、氧化酶试验、TCBS 培养基培养（绿色菌落）、tdh 基因 PCR 检测及肠道细胞侵袭试验，全面确认菌株纯度、生理活性与致病特性，确保后续实验使用效果。
客服1