形态与生化:菌体呈球形或椭圆形,直径 0.5-1.0μm,常成对或短链状排列,无芽孢,无鞭毛(部分菌株有微弱运动性)。最适生长温度 30-37℃,适宜 pH 范围 6.5-7.5,兼性厌氧(有氧、无氧环境均能生长,有氧条件下生长略优);可发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖产酸(不产气),对甘露醇、山梨醇发酵能力因菌株而异,触酶阴性,氧化酶阴性,硝酸盐还原试验阴性,能在含 6.5% 氯化钠的培养基中生长(耐盐性),可耐受 40% 胆汁盐,这些生化特征是杜兰斯肠球菌与肠球菌属其他菌种(如粪肠球菌、屎肠球菌)区分及鉴定的关键依据。
致病性相关:属于条件致病菌,自然存在于乳制品、发酵食品及人和动物肠道中,正常情况下对健康人群无致病性;仅在机体免疫功能严重低下时,可能引发尿路感染、败血症等感染;ATCC 49479 毒力稳定且较弱,主要用于与临床致病肠球菌菌株的对比研究,及食品中肠球菌污染检测的阳性对照。
培养:无需特殊气体环境,常规有氧培养即可。推荐培养基为脑心浸液琼脂(BHI)、麦康凯琼脂(MAC,菌落呈无色透明,因不发酵乳糖)、肠球菌选择性培养基(如叠氮钠血琼脂),37℃培养 24-48 小时。在 BHI 琼脂上菌落呈圆形、乳白色、表面光滑湿润,边缘整齐,直径 0.5-1.5mm;在血琼脂上部分菌株可出现 α- 溶血(草绿色溶血环),无 β- 溶血现象。
保存:短期保存(1-4 周)可将活化菌株接种至 BHI 琼脂斜面,4℃冷藏保存,期间需定期观察菌株活力,避免杂菌污染;长期保存(6 个月以上)建议采用 - 80℃甘油冷冻保存(20% 无菌甘油与菌液 1:1 体积混合)或冻干保存(添加脱脂乳、蔗糖等保护剂)。菌株复苏时,需将冻存菌液或冻干菌粉转接至 BHI 肉汤,37℃振荡培养 12-18 小时,待菌液浑浊后,再转接至固体培养基纯化,确保菌株纯度与活性符合实验要求。
应用:在食品检测领域,作为乳制品、发酵食品(如奶酪、发酵香肠)中杜兰斯肠球菌检测的质控菌株,验证检测方法(如选择性培养、生化鉴定)的准确性;在食品工业中,用于研究杜兰斯肠球菌在发酵过程中的代谢特性(如产乳酸、抗菌物质),优化食品发酵工艺;在微生物科研中,作为肠球菌属细菌的模式菌株,用于肠球菌分类鉴定、耐药性监测及肠道微生态互作研究;此外,还可用于微生物教学实验,演示革兰氏阳性球菌的形态、培养及生化反应特征。
安全:需在生物安全一级(BSL-1)实验室开展常规操作,若涉及大量培养或 aerosol 产生的实验(如振荡培养、离心),建议升级至 BSL-2 防护;操作人员需佩戴无菌手套、口罩,避免皮肤直接接触菌液;实验后污染耗材(如培养皿、移液器吸头)需经 121℃高压灭菌 30 分钟,实验台面用 75% 乙醇或含氯消毒剂(有效氯 1000mg/L)擦拭消毒;菌株储存需单独标注(含菌株名称、编号、保存日期),与其他微生物菌株分区存放,防止交叉污染,保障实验室操作安全。


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