培养基选择与制备：推荐使用胰酪大豆胨琼脂（TSA），若需观察生物膜形成，可采用含 5% 胎牛血清的 TSA 培养基（血清能促进生物膜基质分泌）。制备时需注意琼脂浓度控制在 1.5%~2.0%（浓度过低易导致菌落扩散，影响计数），灭菌后冷却至 45℃左右倒平板，避免温度过高破坏培养基营养成分。
复苏与浓度校准技巧：冻干菌粉复苏时，需用无菌胰酪大豆胨肉汤（TSB）充分溶解（建议轻轻颠倒离心管 5~8 次，避免涡旋振荡破坏菌体结构），37℃振荡培养（150rpm）16~18 小时后，采用涂布法计数（取 0.1mL 菌液涂布于 TSA 平板）。若浓度偏离 log3 级别（误差＞±0.1 log），需排查培养时间是否不足（该菌株生长速度略慢于金黄色葡萄球菌，振荡培养可缩短复苏周期）或菌液稀释时是否存在误差（推荐使用 1mL 无菌吸管进行梯度稀释，确保稀释精度）。
生物膜观察操作要点：若需验证生物膜形成能力，可将复苏菌液按 1:100 比例接种至含血清的 TSA 平板，37℃培养 48 小时后，用 0.9% 无菌生理盐水轻轻冲洗平板表面（去除浮游菌），再用结晶紫染色 10 分钟，清水脱色后可观察到菌落周围紫色的生物膜环，环直径≥2mm 即为生物膜形成阳性，符合该标准菌株的特性要求。
安全管控等级：该菌株属非致病性菌，BSL-1 实验室即可操作，气溶胶操作无需生物安全柜（常规无菌超净台即可），操作人员仅需佩戴无菌手套与普通医用口罩，无需穿防护服，降低实验操作成本与复杂度。
废弃物处理要求：因无致病因子与耐热毒素，含菌培养物可直接 121℃高压灭菌 20 分钟（比金黄色葡萄球菌缩短 10 分钟），实验台面用 500mg/L 有效氯消毒剂擦拭，作用 5 分钟即可，简化废弃物处理流程。
长期存储技巧：长期保存建议采用冻干法（含 10% 脱脂乳保护剂），4℃干燥避光存放，保质期可达 5 年；若采用 - 80℃甘油冷冻法，需将菌液与 50% 无菌甘油按 1:1 比例混合（甘油终浓度 25%，避免浓度过高损伤菌体），分装后快速冷冻，避免反复冻融（反复冻融会导致生物膜形成能力下降）。存储时需单独存放于普通双锁冰箱，与致病性葡萄球菌菌株分区，标签注明 “非致病性表皮葡萄球菌（WDCM 00036）” 及存储日期，便于管理与追溯。
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