ATCC 8739RT10 大肠杆菌(Escherichia coli)WDCM 00012,WDCM 00196 产品说明
一、菌株核心价值(适配实际场景)
作为获双 WDCM 编号(00012、00196)认证的国际标准菌株,核心优势是稳定的生化表型、非致病性、广谱环境适应性及国际溯源性,适配《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠杆菌计数》《临床实验室标准化协会(CLSI)微生物检测标准》及欧盟 EC No.2073/2005 标准,是食品、饮用水卫生监测及跨国实验室质量比对的关键阳性对照菌。与 ATCC19404(厌氧芽孢菌)不同,其兼性厌氧特性可模拟食品加工车间(如乳制品、肉制品生产线)、饮用水管网等多场景污染,填补厌氧菌在需氧菌质控中的空白;双 WDCM 认证确保检测结果可国际互认,尤其适用于进出口食品企业、跨国餐饮连锁的卫生质控,可精准评估食品污染程度及消毒产品(如季铵盐类、含氯消毒剂)杀灭效能(需使菌浓度下降≥5 log)。此外,还可作为药品无菌检查阳性对照、培养基适用性验证标准株,因非致病性,操作安全性远高于致病菌株,降低实验室感染风险。
二、培养与复苏要点
推荐麦康凯琼脂(MAC)或胰酪大豆胨琼脂(TSA),MAC 上菌落呈粉红色、圆形光滑湿润(具乳糖发酵特性,与非发酵菌鉴别),TSA 上菌落呈乳白色、边缘整齐;液体培养(胰酪大豆胨肉汤,TSB)时呈均匀浑浊,无沉淀(与芽孢菌液体培养特性差异显著)。培养条件:温度 37℃±1℃,无需严格控湿(常规培养箱湿度 50%-60% 即可),兼性厌氧培养(振荡转速 180rpm 可促进菌体增殖,静态培养也可生长),培养 18-24 小时即可达对数期(比 ATCC19404 复苏周期短)。复苏步骤:取冻干菌粉,加入 2mL 无菌 TSB,涡旋振荡 1 分钟使菌粉溶解,37℃、180rpm 振荡培养 18 小时活化菌体;取菌液 0.1mL 涂布 MAC 平板,37℃培养 24 小时,挑取粉红色单菌落转接至新鲜 TSB,培养 16 小时制得浓度 10?-10? CFU/mL 的菌悬液。浓度校准采用涂布计数法(误差 ±0.2 log),形态鉴别为革兰氏阴性短杆状(直径 0.5-1.0μm,长度 1.0-2.0μm);生化特性为发酵乳糖产酸产气、靛基质试验阳性、氧化酶阴性(与其他肠杆菌科菌株鉴别,特性稳定可重复)。
三、安全管控与存储
属 BSL-1 级菌(非致病),常规超净台操作即可,个人防护仅需佩戴无菌手套、一次性口罩及实验服(无需防护服,与 BSL-2 级致病菌株管控差异显著)。环境消毒:实验结束后,用 0.2% 含氯消毒剂擦拭超净台台面及实验器具,开启紫外灯照射 30 分钟;若发生菌悬液泄漏,用浸有含氯消毒剂的纸巾覆盖 20 分钟后清理。废弃物处理:含菌培养物需 121℃高压灭菌 20 分钟(比 ATCC19404 短 10 分钟,因无芽孢结构);实验耗材灭菌后按普通废弃物处理,无需按医疗有害废弃物分类。存储推荐冻干法(菌悬液与 10% 脱脂乳 + 5% 蔗糖保护剂 1:1 混合,冻干后 4℃存放,保质期 5 年,存活率≥90%);-80℃冷冻法(菌悬液与 50% 无菌甘油 1:1 混合,分装冻存,保质期 3-4 年,反复冻融 3 次内活性稳定);短期存储可将菌液接种至 TSB 斜面,4℃冷藏存放 1 个月(每周需传代 1 次)。需存放于双锁冰箱的非致病菌区域,与厌氧菌、致病菌严格分区;标签注明 “大肠杆菌(ATCC8739RT10,WDCM 00012/00196)”“非致病”“存储日期”,建立领用台账,因双 WDCM 认证菌株特性稳定,质控操作便捷性优于非认证菌株。


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