ATCC 13883 肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae WDCM 00097）产品简介
一、产品名称
二、产品特点
生物安全与来源：生物安全等级为 2 级（BSL-2），具国际标准菌株典型致病性，广泛应用于全球微生物实验室，可引发呼吸道（肺炎、慢性阻塞性肺病急性加重）、泌尿道（肾盂肾炎）及血流感染（败血症），尤其适配免疫缺陷动物感染模型构建，操作需在生物安全柜内进行，器具使用后需 121℃高压灭菌 30 分钟。菌株分离自临床败血症患者血液样本，经 WDCM 认证其生物学特性（荚膜结构、生化反应、药敏谱）符合肺炎克雷伯菌国际标准株要求，全基因组序列已上传至公共数据库（如 GenBank），可作为全球实验室开展跨区域、跨平台研究的 “统一基准”，避免因菌株差异导致的实验结果偏差。
形态与培养特性：革兰氏阴性短杆菌，具国际标准株特有的稳定形态与培养表型：
显微镜形态：菌体呈短杆状（0.6-1.1μm×1.6-2.6μm），大小均一性优于普通临床菌株（变异系数≤5%，符合国际标准株形态一致性要求），单个或成对排列（呈 “双球状” 聚集的比例稳定在 30%-40%，可作为形态质控指标），无芽孢，无鞭毛（动力试验 100% 阴性，国际标准鉴别要点之一，区别于动力试验偶呈弱阳性的临床分离株），革兰氏染色呈均匀深红色（染色效果稳定，不同实验室操作差异对染色结果影响小，适配跨实验室染色比对），荚膜染色可见厚度均一的厚荚膜（荚膜厚度约 0.6-1.1μm，厚度变异系数≤8%，厚于普通肺炎克雷伯菌，是国际标准株抗吞噬能力稳定的关键结构）；
培养要求：兼性厌氧，对培养环境适应性强（在 5%-10% CO?或普通空气环境中生长差异≤10%，适配不同实验室培养条件），最适培养基为麦康凯琼脂（国际标准配方）、伊红美蓝琼脂（EMB，符合 CLSI 标准）及营养琼脂，最适温度 35-37℃（温度波动 ±1℃时，生长速率变化≤5%），生长速度标准化（18 小时菌落直径可达 1.0-1.2mm，24 小时达 1.5-2.0mm，可作为培养基质量监控指标），核心特征为产酸产气稳定性（在麦康凯琼脂上 100% 形成粉红色菌落，产酸强度稳定，菌落颜色 Lab * 色值波动范围≤3，易与非发酵菌区分，适配自动化菌落识别系统校准）；
菌落形态：麦康凯琼脂上呈圆形、表面光滑黏稠且边缘规则的粉红色菌落（直径 1.5-2.0mm），质地柔软具弹性，挑取时拉丝长度稳定在 2.5-4.5cm（拉丝长度变异系数≤10%，国际标准株拉丝特性质控指标），菌落表面光泽度均匀（无局部光泽差异，适配肉眼与自动化菌落形态分析）；在 EMB 琼脂上呈紫黑色、中心带明显金属光泽的菌落（光泽度评分≥4 分，满分 5 分，符合国际标准株菌落光泽要求），无溶血现象（接种绵羊血琼脂后，99% 以上菌落周围无溶血环，区别于溶血性肺炎克雷伯菌变种）；菌落易与普通肺炎克雷伯菌混淆，需通过形态均一性、荚膜厚度稳定性及培养表型一致性进一步确认其标准株属性。
生化与药敏特性：生化反应具国际标准株特有的 100% 一致性，药敏谱符合 CLSI 全球推荐标准：
生化特性：氧化酶阴性、触酶阳性（阳性反应时间稳定在 10-20 秒，无延迟反应），发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖产酸产气（发酵速率稳定，产气量差异≤5%），不发酵麦芽糖、肌醇、山梨醇（100% 不发酵，国际标准株与产酸克雷伯菌的核心区分点，普通临床株偶见麦芽糖发酵弱阳性），VP 试验强阳性（反应时间≤4 小时），甲基红试验阴性，枸橼酸盐利用试验阳性（48 小时内 100% 阳性，无假阴性），生化反应结果符合 CLSI《肠杆菌科细菌生化鉴定标准》，可作为生化鉴定卡全球性能验证的 “金标准菌株”；
药敏特性：核心优势在于全球统一药敏基准谱，对 CLSI 推荐的 12 类 20 种常用抗菌药物敏感性 100% 稳定（无耐药性波动），其中对头孢曲松 MIC 值固定为 0.25μg/mL（CLSI 推荐的肺炎克雷伯菌敏感株质控 MIC 值），左氧氟沙星 MIC 0.5μg/mL，庆大霉素 MIC 1μg/mL，阿莫西林 / 克拉维酸 MIC 2μg/mL，仅对氨苄西林天然耐药（MIC≥64μg/mL，符合国际天然耐药谱标准），药敏结果可直接用于全球 AST 试剂生产企业的产品校准、临床实验室 AST 能力验证及抗菌药物敏感性判定标准制定，同时其毒力基因（如荚膜合成基因 wzi、菌毛基因 fimH）表达水平稳定，是研究肺炎克雷伯菌毒力标准化的理想模型。
三、储存环境
未开封状态：以冻干粉（真空包装，符合国际标准菌株包装规范，含 10^7-10^8 CFU / 支，添加国际认证的荚膜保护剂与表型稳定剂）或甘油菌悬液（20% 甘油，符合 ATCC 与 WDCM 双重标准，10^6 CFU/mL，-80℃专用）供应：
冻干粉：-20℃以下冷冻保存（可保存 2 年，符合国际标准株短期保存要求），长期（>2 年）必须置于 - 80℃±5℃储存（温度波动范围严格控制，避免因温度不稳定导致的表型漂移），严禁反复冻融（冻融次数≥3 次时，活菌率下降≥60%，且荚膜厚度变异系数升至 15% 以上），保质期 5 年（经 WDCM 认证的保质期，长于普通肺炎克雷伯菌菌株）；
甘油菌：直接 - 80℃±5℃保存（不可在 - 20℃存放，否则会导致菌体破裂与药敏表型改变），室温暴露 20 分钟致活力下降 40%（暴露时间≤10 分钟时，活力下降≤15%，需严格控制室温操作时间），保质期 3 年，解冻后需一次性使用（不可分装，防止因分装导致的菌株污染或表型变异，符合国际标准株使用规范）。
复苏后状态：复苏菌液（营养肉汤，符合 CLSI 标准配方）2-8℃冷藏 7 天内使用（7 天内药敏 MIC 值波动≤1 个稀释度，符合国际标准）；斜面培养物（营养琼脂斜面，含国际标准配方添加剂）2-8℃冷藏 4 周内传代（传代间隔≥7 天时，表型稳定性最佳），传代无需特殊环境，使用前需通过三项关键指标验证：①镜检确认菌体大小均一性（变异系数≤8%）；②麦芽糖发酵试验（100% 阴性）；③头孢曲松药敏 MIC 值（0.25μg/mL±0.1μg/mL），确保表型未漂移，符合国际标准株要求。
四、使用方法
复苏操作：严格遵循国际标准株复苏流程，生物安全柜内，冻干粉加 1mL CLSI 标准配方营养肉汤溶解，37℃±0.5℃恒温培养箱（温度精度需符合国际标准）静态培养 18-24 小时；待菌液 OD600 值稳定在 0.8-0.9（吸光度变异系数≤3%）、镜检见大小均一的粗短杆状菌体，且接种麦康凯琼脂（国际标准配方）形成粉红色拉丝菌落（拉丝长度 2.5-4.5cm）时，通过生化鉴定卡（如 VITEK 2 GN 卡）验证生化反应 100% 符合标准后使用（复苏成功率≥99%，符合国际标准株复苏要求）。
传代培养：挑取麦康凯琼脂上的粉红色单菌落（选择菌落中心、形态最典型的菌体），划线接种新鲜 CLSI 标准配方麦康凯琼脂平板，37℃±0.5℃培养 18-24 小时；斜面保存后 2-8℃冷藏，传代≤5 代（传代次数≥6 代时，荚膜厚度变异系数升至 12% 以上，不符合国际标准），每次传代后需进行 “形态 - 生化 - 药敏” 三重验证：①革兰氏染色确认染色稳定性；②VP 试验与枸橼酸盐利用试验确认生化一致性；③头孢曲松与氨苄西林药敏确认耐药谱稳定性，确保菌株始终符合 WDCM 00097 标准属性。
应用操作：
国际标准化研究：用于全球跨实验室 AST 结果比对（如 WHO 抗菌药物敏感性监测项目）、诊断试剂全球市场准入验证（如 CE、FDA 认证时的菌株性能验证），及肠杆菌科细菌分类学国际标准制定，确保不同国家、不同实验室的检测结果具有可比性；
临床实验室能力验证：作为各级临床检验中心开展肺炎克雷伯菌鉴定与 AST 能力验证的 “标准菌株”，用于评估实验室检测技术水平（如形态识别、生化鉴定、药敏判读准确性），提升临床检测质量；
药物研发与质控：用于新型抗肺炎克雷伯菌药物（如新型 β- 内酰胺酶抑制剂、荚膜多糖疫苗）研发过程中的体外活性评价与质量控制，确保药物研发数据的全球一致性；
国际协作研究：作为全球肺炎克雷伯菌毒力进化、耐药传播机制研究的 “统一实验材料”，助力跨国科研团队开展协作研究（如全球肺炎克雷伯菌荚膜分型流行趋势分析），为制定全球统一的感染防控策略提供数据支持。
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