形态：革兰氏阳性球菌，显微镜下呈不规则葡萄串状排列（排列松散度介于金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌之间），无芽孢与鞭毛，无荚膜（与假中间葡萄球菌的厚荚膜区分），大小约 0.6-1.0μm。在普通营养琼脂上形成直径 0.8-1.8mm 的白色至乳白色菌落，质地柔软、表面光滑平坦，边缘整齐（无凸起光泽，与假中间葡萄球菌的凸起菌落区分）；在血琼脂培养基上表现为 γ- 溶血（不溶血，与假中间葡萄球菌的强 β- 溶血明确区分）；在含 7.5% 氯化钠的甘露醇高盐琼脂培养基上可生长（耐盐性中等），且不发酵甘露醇（培养基不变色，与金黄色葡萄球菌区分）；在麦康凯培养基上不生长（与革兰氏阴性肠道菌区分），此凝固酶阴性、不溶血特性是关键鉴别标志。
生理生化：兼性厌氧微生物，最适生长温度 35-37℃（适配人体体温，28-40℃范围内均可生长），最适 pH 值 7.2-7.6，对营养要求低，在普通营养琼脂、LB 培养基、TSB 培养基中生长速度慢于假中间葡萄球菌。生化反应中，触酶试验阳性（弱阳性反应，气泡生成量少），凝固酶试验阴性（核心鉴别特征，与假中间葡萄球菌的凝固酶阳性区分），氧化酶试验阴性，硝酸盐还原试验阳性，甲基红试验阴性，VP 试验阴性；关键生化特性为尿素酶阳性（能快速分解尿素产氨，使尿素培养基变红，24 小时内可观察到阳性反应，与其他凝固酶阴性葡萄球菌区分）；糖类发酵方面，可发酵葡萄糖、蔗糖（产酸不产气），不发酵麦芽糖、甘露醇、乳糖；毒力特性上，携带泌尿系感染相关毒力基因（如黏附素基因 ssp、生物膜形成基因 icaD），对尿路上皮细胞黏附能力极强（易附着于膀胱黏膜表面），主要引发女性急性单纯性膀胱炎（尤其年轻女性），偶可引发肾盂肾炎，无明显人兽共患传播风险（与假中间葡萄球菌的人兽共患风险区分）。
培养基：常规培养优先选用营养琼脂或 LB 培养基（35-37℃培养 24-30 小时，补偿生长速度慢的特性）；临床尿样分离推荐使用血琼脂培养基（观察不溶血特性）+ 尿素培养基（快速检测尿素酶阳性）；与其他葡萄球菌鉴别需使用凝固酶试验培养基（验证阴性）与甘露醇高盐琼脂培养基（验证不发酵）；药物敏感性试验需采用 MH 培养基（符合 CLSI 临床标准，确保药敏结果准确性）；泌尿系黏附研究可选用人膀胱上皮细胞培养板（模拟体内感染环境）。
操作：固体培养置于 35-37℃恒温培养箱静置 24-30 小时，可形成形态典型的单菌落（需重点观察菌落颜色与溶血情况）；液体培养采用 35-37℃、150-180rpm 摇床振荡培养 20-24 小时（振荡速率低于假中间葡萄球菌），培养后期菌液呈轻微浑浊状（浊度低于假中间葡萄球菌），菌浓度可达 10?-10?CFU/mL，且能最大程度保留尿路上皮黏附能力。传代次数建议控制在 5 代以内，温度波动需≤±1℃，避免因传代过多导致尿素酶活性减弱或黏附基因表达下降。
短期（1-2 周）：取 35-37℃培养 24 小时的纯培养菌株（需确认凝固酶阴性、尿素酶阳性、不溶血），接种至营养琼脂斜面培养基，35℃培养 16 小时后，密封斜面管口置于 4℃冰箱冷藏保存。每 3-4 天观察一次菌株状态，若发现菌落干燥、污染、尿素酶阳性反应延迟，需及时重新接种（优先在 35-37℃条件下复壮），防止菌株失活或特性改变。
长期（3 年以上）：推荐两种高效保存方法：①冷冻干燥保存法：取对数生长期菌液（OD600=0.7-0.9，培养 24 小时），与含 10% 脱脂乳 + 0.5% 酵母提取物 + 0.1% 尿素（保护尿素酶活性）的复合保护剂按 1:1 体积比充分混匀，分装至无菌冷冻管（每管 0.5mL），经 - 20℃预冻 3 小时、-80℃冷冻 6 小时梯度降温后进行冷冻干燥，干燥完成后置于 - 80℃冰箱保存，保存期限可达 5-7 年，复苏后尿素酶活性与尿路上皮黏附能力保留率≥95%；②甘油冷冻保存法：将对数生长期菌液与无菌甘油（终浓度 20%，与假中间葡萄球菌的 25% 区分）混合均匀，分装至无菌冷冻管（每管 1mL），直接放入 - 80℃冰箱保存，保存期限 3-5 年，操作简便（复苏时需接种至尿素培养基与血琼脂双培养基，同时验证核心特性）。长期保存需每 12 个月复苏一次，复苏后通过革兰氏染色、凝固酶试验、尿素酶试验、溶血试验及人膀胱上皮细胞黏附试验，全面确认菌株纯度、生理活性与泌尿系致病性，确保后续实验使用效果。
客服1